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Diferenciaci�n y nuevos hallazgos patol�gicos de Entamoebas (histolytica/dispar/moshkovskii), mediante pruebas PCR
Differentiation and new pathological findings of Entamoebas (histolytica/dispar/moshkovskii), using PCR tests
Diferencia��o e novos achados patol�gicos de Entamoebas (histolytica/dispar/moshkovskii), usando testes de PCR
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Correspondencia: adiaz@unach.edu.ec
Ciencias T�cnicas y Aplicadas
Art�culo de Investigaci�n
* Recibido: 23 de agosto de 2022 *Aceptado: 28 de septiembre de 2022 * Publicado: 07 de octubre de 2022
I. Docente Universidad Nacional de Chimborazo (UNACH), Riobamba, Ecuador.
II. Docente Universidad Nacional de Chimborazo (UNACH), Riobamba, Ecuador.
III. Docente Universidad Nacional de Chimborazo (UNACH), Riobamba, Ecuador.
IV. Docente Universidad Nacional de Chimborazo (UNACH), Riobamba, Ecuador.
Resumen
La amebiasis es una infecci�n parasitaria intestinal causada por el protozoario Entamoeba histolytica. Los estudios epidemiol�gicos sobre infecciones por Entamoebas que especifican la especie son escasos debido a la gran similitud morfol�gica de Entamoeba histolytica pat�gena y E. dispar y E. moshkovskii no pat�genas. El diagn�stico de E. histolytica se basa frecuentemente en la detecci�n por microscop�a, sin embargo, la lectina espec�fica de E. histolytica no se expresa en quistes, que son eliminados por individuos asintom�ticos, lo que lleva a falsos negativos y, por ende, una subestimaci�n de la prevalencia de amebiasis. En esta investigaci�n se describe un m�todo altamente sensible y espec�fico que permite la detecci�n de diferentes especies de Entamoeba, denominado Reacci�n en cadena de Polimerasa (PCR). Objetivo: Identificar el uso del PCR como metodolog�a diagn�stica que permita la diferenciaci�n de entamoebas pat�genas y no pat�genas, mediante la revisi�n de literatura actualizada. M�todos: Estudio correlacional, descriptivo y sistem�tico, basado en una revisi�n de 18 documentos entre los a�os 2018 - 2022, que contienen informaci�n clara y concreta respecto al tema, en ingl�s y espa�ol, de un total de 35 art�culos hallados, fueron seleccionados 18 documentos que cumplen apropiadamente con los criterios de exclusi�n e inclusi�n. Discusi�n: El rendimiento diagn�stico de PCR para la detecci�n y diferenciaci�n de E. histolytica, E. dispar y E. moshkovskii, muestra niveles altos de sensibilidad y especificidad en su utilizaci�n en varios ensayos alrededor del mundo, adem�s sintetiza el procedimiento a condiciones en las que se obtengan menores tasas de falsos positivos o negativos, facilitando as� el manejo cl�nico y la documentaci�n de cifras m�s reales de infecci�n por amebas. Los hallazgos patol�gicos conocidos son la infecci�n intestinal resultante en diarrea o disenter�a en su forma m�s complicada, y la presentaci�n de infecci�n extraintestinal que afecta principalmente al h�gado en forma de absceso hep�tico amebiano. Conclusiones: La diferenciaci�n de Entamoebas histolytica, dispar y moshkovskii mediante varias metodolog�as de PCR ha demostrado ser una prueba diagn�stica altamente eficaz, que supera por mucho a la microscop�a utilizada habitualmente para el an�lisis de muestras de heces en ex�menes parasitarios; el diagn�stico de amebiasis por PCR permite el reconocimiento espec�fico del g�nero de entamoeba que infecta al hu�sped, lo que permite establecer cifras epidemiol�gicas m�s precisas y reales de la amebiasis y sus posibles complicaciones a ra�z de infecciones en donde coexisten diferentes tipos de entamoebas.
Palabras clave: Entamoeba histolytica; Dispar; Moshkovskii; Diagn�stico y diferenciaci�n; Reacci�n en cadena de polimerasa.
Abstract
Amebiasis is an intestinal parasitic infection caused by the protozoan Entamoeba histolytica. Species-specific epidemiologic studies of Entamoebas infections are scarce because of the close morphologic similarity of pathogenic Entamoeba histolytica and nonpathogenic E. dispar and E. moshkovskii. Diagnosis of E. histolytica is frequently based on detection by microscopy, however, the specific lectin of E. histolytica is not expressed in cysts, which are shed by asymptomatic individuals, leading to false negatives and thus a underestimation of the prevalence of amebiasis. This research describes a highly sensitive and specific method that allows the detection of different species of Entamoeba, called Polymerase Chain Reaction (PCR). Objective: To identify the use of PCR as a diagnostic methodology that allows the differentiation of pathogenic and non-pathogenic entamoebas, through the review of updated literature. Methods: Correlational, descriptive and systematic study, based on a review of 18 documents between the years 2018 - 2022, which contain clear and specific information regarding the subject, in English and Spanish, of a total of 35 articles found, 18 documents were selected. that appropriately meet the exclusion and inclusion criteria. Discussion: The diagnostic performance of PCR for the detection and differentiation of E. histolytica, E. dispar and E. moshkovskii, shows high levels of sensitivity and specificity in its use in various assays around the world, and also synthesizes the procedure under conditions in which that lower rates of false positives or negatives are obtained, thus facilitating clinical management and the documentation of more real numbers of amoeba infection. The known pathological findings are intestinal infection resulting in diarrhea or dysentery in its most complicated form, and the presentation of extraintestinal infection that mainly affects the liver in the form of amoebic liver abscess. Conclusions: The differentiation of Entamoebas histolytica, dispar and moshkovskii by means of various PCR methodologies has proven to be a highly effective diagnostic test, which far exceeds the microscopy commonly used for the analysis of stool samples in parasitic examinations; The diagnosis of amebiasis by PCR allows the specific recognition of the genus of entamoeba that infects the host, which allows establishing more precise and real epidemiological figures of amebiasis and its possible complications as a result of infections where different types of entamoebas coexist.
Keywords: Entamoeba histolytica; Disparate; Moshkovskii; Diagnosis and differentiation; Polymerase chain reaction.
Resumo
A ameb�ase � uma infec��o parasit�ria intestinal causada pelo protozo�rio Entamoeba histolytica. Estudos epidemiol�gicos espec�ficos de esp�cies de infec��es por Entamoebas s�o escassos devido � estreita semelhan�a morfol�gica de Entamoeba histolytica patog�nica e E. dispar e E. moshkovskii n�o patog�nicas. O diagn�stico de E. histolytica � frequentemente baseado na detec��o por microscopia, entretanto, a lectina espec�fica de E. histolytica n�o � expressa em cistos, que s�o excretados por indiv�duos assintom�ticos, levando a falsos negativos e, portanto, subestimando a preval�ncia de ameb�ase. Esta pesquisa descreve um m�todo altamente sens�vel e espec�fico que permite a detec��o de diferentes esp�cies de Entamoeba, denominado Rea��o em Cadeia da Polimerase (PCR). Objetivo: Identificar o uso da PCR como metodologia diagn�stica que permite a diferencia��o de entamoebas patog�nicas e n�o patog�nicas, por meio da revis�o de literatura atualizada. M�todos: Estudo correlacional, descritivo e sistem�tico, baseado em uma revis�o de 18 documentos entre os anos de 2018 a 2022, que cont�m informa��es claras e espec�ficas sobre o assunto, em ingl�s e espanhol, de um total de 35 artigos encontrados, foram selecionados 18 documentos . que atendam adequadamente aos crit�rios de exclus�o e inclus�o. Discuss�o: A performance diagn�stica da PCR para detec��o e diferencia��o de E. histolytica, E. dispar e E. moshkovskii, apresenta altos n�veis de sensibilidade e especificidade em seu uso em diversos ensaios ao redor do mundo, al�m de sintetizar o procedimento em condi��es em que s�o obtidas taxas mais baixas de falsos positivos ou negativos, facilitando assim o manejo cl�nico e a documenta��o de n�meros mais reais de infec��o por ameba. Os achados patol�gicos conhecidos s�o infec��o intestinal resultando em diarreia ou disenteria em sua forma mais complicada, e a apresenta��o de infec��o extraintestinal que acomete principalmente o f�gado na forma de abscesso hep�tico amebiano. Conclus�es: A diferencia��o de Entamoebas histolytica, dispar e moshkovskii por meio de v�rias metodologias de PCR provou ser um teste diagn�stico altamente eficaz, que supera em muito a microscopia comumente utilizada para an�lise de amostras de fezes em exames parasit�rios; O diagn�stico de ameb�ase por PCR permite o reconhecimento espec�fico do g�nero de entamoeba que infecta o hospedeiro, o que permite estabelecer n�meros epidemiol�gicos mais precisos e reais da ameb�ase e suas poss�veis complica��es decorrentes de infec��es onde coexistem diferentes tipos de entamoebas.
Palavras-chave: Entamoeba histolytica; Desigual; Moshkovskii; Diagn�stico e diferencia��o; Rea��o em cadeia da polimerase.
Introducci�n
Entre ellos, E. histolytica es la �nica especie pat�gena conocida y descrita hasta el momento, y conlleva un alto riesgo de morbilidad y mortalidad. La infecci�n se transmite principalmente por v�a fecal � oral, a trav�s de la ingesti�n de agua o alimentos contaminados por heces que contienen quistes de E. histolytica. Estos quistes son resistentes a la desinfecci�n y temperaturas extremas, adem�s pueden sobrevivir en ambientes acu�ticos durante varios meses. La infecci�n parece ser m�s com�n en los hombres, a pesar de la misma exposici�n de hombres y mujeres a la infecci�n por E. histolytica. (Mohamed Hassan et al., 2021)
La amebiasis posee un amplio espectro de peculiaridades cl�nicas que van desde la infecci�n asintom�tica hasta la amebiasis extraintestinal con desarrollo de abscesos. Cerca del 90% de los infectados son asintom�ticos, portadores del par�sito en forma de quiste, y solo el 10% de las personas infectadas desarrollan la forma pat�gena del protozoario que se manifiesta como trofozo�to, presentando s�ntomas de la enfermedad. (Singh et al., 2021) Seg�n la presentaci�n cl�nica, la amebiasis se puede manifestar en dos formas cl�nicas principales, la amebiasis intestinal y extraintestinal. La amebiasis intestinal, es la forma m�s com�n de enfermedad, ocurre cuando se invade la mucosa generalmente del ciego; y los s�ntomas van desde dolor abdominal hasta colitis ulcerosa con mucosidad y sangre, conocida como disenter�a amebiana. (Villamizar et al., 2019) Por su parte, la amebiasis extraintestinal envuelve diversas formas de enfermedades dependiendo del �rgano infectado, que generalmente son el h�gado y pulm�n derecho, aunque tambi�n se han descrito casos de afectaci�n pulmonar izquierda y peric�rdica por continuidad anat�mica. Aunque estas formas cl�nicas comparten varios s�ntomas usuales, como fiebre, p�rdida de apetito o n�useas, algunos signos son espec�ficos de la forma cl�nica. Sin embargo, en este estad�o, la amebiasis puede ser fatal si no se tiene un diagn�stico y tratamiento temprano y adecuado. (Guevara et al., 2019)
Epidemiol�gicamente hablando, la Entamoeba histolytica es un par�sito protozoario pat�geno ampliamente distribuido en todo el mundo, afectando aproximadamente al 10% de la poblaci�n mundial, con cerca de 50 000 a 100 000 muertes reportadas anualmente, lo que la convierte en una causa importante de muerte por par�sitos protozoarios. (Nasrallah et al., 2022) Es posible que esta alta tasa de infecci�n est� hinchada como consecuencia de falsos positivos causados por E. dispar y E. moshkovskii, las cuales son especies de Entamoebas morfol�gicamente indistinguibles de E. histolytica, pero no poseen capacidad pat�gena; consider�ndose especies de vida libre, ya que son gen�tica y bioqu�micamente diferentes. (Mohamed Hassan et al., 2021)
La prevalencia de cada especie de este complejo no est� correctamente caracterizada en muchas regiones geogr�ficas. Algunos informes sugieren un papel importante de E. dispar en la provocaci�n de s�ntomas intestinales y extraintestinales en humanos, sin embargo, su patogenicidad sigue sin estar clara, pero su prevalencia es 10 veces mayor que E. Histolytica, en todo el mundo. (Soares et al., 2019)
La Organizaci�n Mundial de la Salud recomienda que se traten los casos en los que se identifique E. histolytica, est�n o no presentes s�ntomas cl�nicos debido a su diseminaci�n en forma de quistes no patol�gicos, pero con propiedades infecciosas, para disminuir la diseminaci�n y posterior patogenia en pacientes con entornos favorables para padecerla. (Bernet S�nchez et al., 2020)
Los m�todos diagn�sticos de la amebiasis se basan principalmente en t�cnicas como la microscop�a y cultivos, o tambi�n pruebas serol�gicas como el ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas (ELISA). Sin embargo, la observaci�n microsc�pica del par�sito en heces, fluidos corporales o muestras de tejido a�n es considerado como el "est�ndar de oro" en el diagn�stico, pero existe un inter�s progresivo en m�todos alternativos que superan las limitaciones del examen microsc�pico, el cual requiere mucho tiempo y depende en gran medida de la experiencia y habilidades del operador que lo realiza. (Ibne Karim & Shantanu, 2021) Es por eso que en este estudio se plantea la detecci�n de ADN por Reacci�n en Cadena de Polimerasa, (PCR), este m�todo muestra mejores resultados de distinci�n entre la E. histolytica pat�gena y las amebas no pat�genas y ha mejorado la especificidad, y la tasa de verdaderos positivos del ADN objetivo de E. histolytica. (Calle Pacheco et al., 2022)
Metodolog�a
Estudio descriptivo, correlacional y sistem�tico, apoyado en una revisi�n bibliogr�fica de 18 documentos con car�cter cient�fico obtenidos previamente en sitios de divulgaci�n comprobados como Medline, ScienceDirect, Cochrane, ClinicalKey, PubMed, Medscape, entre otros. Los documentos tomados en cuenta para la realizaci�n de este trabajo son de los �ltimos 5 a�os en idioma ingl�s y espa�ol, y su b�squeda se fundament� en el uso de marcadores como: amoebiasis intestinal y extraintestinal, diferenciaci�n de Entamoebas, Reacci�n en Cadena de Polimerasa y diagn�stico molecular de Entamoebas. Se analizaron art�culos cient�ficos entre revisiones sistem�ticas y Meta - an�lisis que se obtuvieron en la b�squeda, los cuales incluyen estudios sobre el diagn�stico y diferenciaci�n de Entamoeba en sus formas patol�gicas y no patol�gicas y la metodolog�a diagn�stica basada en la reacci�n en cadena de polimerasa, entre otros aspectos referentes al tema. Los art�culos excluidos fueron aquellos que conten�an informaci�n sobre otro tipo de par�sitos intestinales, diagn�sticos con metodolog�as de imagen, y de m�s de 5 a�os de antig�edad.
Estrategia de b�squeda
La recopilaci�n de informaci�n se realiz� con el uso de diferentes bases de datos como, Medline, Cochrane, Medscape, PubMed, Medline, Cochrane, ScienceDirect, Google Acad�mico y de revistas cient�ficas como New England Journal of Medicine.
Criterios de inclusi�n y exclusi�n
Fueron incluidos art�culos originales, en los idiomas espa�ol e ingl�s. Los art�culos utilizados respond�an a dise�os observacionales o experimentales, donde se reflejaron datos que respondieran a los intereses de la investigaci�n. De todos los art�culos incluidos se extrajo informaci�n relevante como pa�s de realizaci�n, objetivos, pacientes estudiados, intervenciones, as� como resultados obtenidos.
Se excluyeron los estudios que no concordaban con los criterios de b�squeda en cuanto al tipo de diagn�stico, cartas al editor, art�culos con informaci�n duplicada, incompleta, imprecisa o muestras poco representativas incluidas en otros resultados. Adem�s de art�culos que no cumplan con los 5 a�os m�nimos de antig�edad.
Discusi�n
Diferenciaci�n de Entamoebas histolytica, dispar y moshkovskii mediante Reacci�n en Cadena de Polimerasa (PCR)
La amebiasis es un problema importante de salud p�blica en nuestro entorno, debido a factores como la falta de adecuaci�n de la infraestructura sanitaria y la educaci�n en manejo de alimentos e higiene en pa�ses end�micos. Por lo que, los estudios de prevalencia de amebiasis poseen una gran importancia para establecer la poblaci�n en riesgo y la cadena de tratamiento que va desde la prevenci�n hasta la curaci�n de secuelas leves y graves. Raz�n por la cual el diagn�stico correcto �es el primer eslab�n fundamental en esta problem�tica. (Vethencourth Ysea et al., 2021)Tradicionalmente la detecci�n de las especies de entamoeba en laboratorio se ha basado en el examen microsc�pico de muestras de heces frescas o fijadas, este procedimiento es barato y sencillo, pero tiene limitaciones, como la imposibilidad de distinguir entre los quistes o trofozo�tos de la especie pat�gena E. Histolytica, y la no pat�gena E. Dispar, y la de vida libre E. Moshkovskii, los cuales tienen una morfolog�a id�ntica. En los �ltimos a�os, se han desarrollado varios sistemas de detecci�n de prote�nas de ADN para distinguir E. Histolytica de E. Dispar en muestras cl�nicas como la en inmunocromatograf�a y ELISA que tambi�n proporcionan resultados r�pidos, y aunque son pr�cticos y relativamente asequibles, estos m�todos generan con frecuencia tasas elevadas de falsos resultados positivos y negativos, por lo que su uso est� recomendado para el cribado de muestras, mas no para el diagn�stico definitivo. (Dacal et al., 2020)Bajo esta premisa, se postula a la PCR como un m�todo de elecci�n para estudios cl�nicos y epidemiol�gicos de la amebiasis en pa�ses desarrollados y ha sido respaldada por la OMS. (Sindhusuta et al., 2021) Permitiendo de esta forma determinar las tasas de prevalencia de E. histolytica en regiones end�micas utilizando t�cnicas moleculares y planteando este m�todo como una soluci�n radical a las deficiencias de la microscop�a �ptica, demostrado en varios ensayos realizados en pa�ses como Irak, Francia, Bangladesh, Brasil, Ecuador, entre otros. (Mahmood & Bakr, 2020) (Nasrallah et al., 2022) (Guevara et al., 2019) (Soares et al., 2019)
Reacci�n en Cadena de Polimerasa
El uso de la PCR convencional marc� dos principales hitos en el diagn�stico de amebiasis; el primero fue la capacidad para determinar la prevalencia real de la especie E. histolytica y E. dispar, cuyos m�todos de rutina no pudieron resolver, permitiendo la identificaci�n de E. dispar como la especie m�s prevalente, y el segundo fue brindar un diagn�stico efectivo para el tratamiento adecuado de la infecci�n. (Xiao et al., 2019) Despu�s del primer reporte de E. moshkovskii en humanos, la aplicaci�n de PCR para el diagn�stico de amebiasis se hizo cada vez m�s importante, centr�ndose en el desarrollo de nuevos protocolos para la detecci�n simult�nea de las especies E. histolytica, E. dispar y E. moshkovskii que se basa en un patr�n diferencial del tama�o de la regi�n central del gen 18S rRNA. (Calle Pacheco et al., 2022)� Estudios basados en esta t�cnica corroboran la alta prevalencia mundial de E. dispar, seguida por E. moshkovskii a nivel regional, este �ltimo asoci�ndose con diarrea en ni�os. (Mulinge et al., 2021)
Por otra parte, existen varias t�cnicas en cuanto al uso del PCR, cada una de ellas se encuentra parametrizada y tiene distintos resultados, entre los cuales se encuentra la metodolog�a PCR anidad, PCR en tiempo real y PCR multiplex. (Calle Pacheco et al., 2022)
Los protocolos de PCR anidados se utilizan generalmente para aumentar sensibilidad de detecci�n, su uso es previamente amplificado como plantilla para realizar una segunda PCR usando anclaje interno con cebadores. (Dacal et al., 2020) Esta t�cnica proporcion� el primer informe de infecci�n por E. moshkovskii en Bangladesh mediante el diagn�stico de amebiasis en muestras fecales de ni�os. (Singh et al., 2021) La t�cnica muestra el tama�o diferencial de 18S ARNr de E. histolytica, E. dispar y E. moshkovskii por secuenciar y correlacionar los resultados con las secuencias polim�rficas del gen ArgTCT tRNA del tres especies.� Basado en la sensibilidad y especificidad del PCR anidado en el diagn�stico de amebiasis, se desarroll� posteriormente un protocolo que incluye cebadores para la detecci�n diferencial de E. moshkovskii, mostrando la discriminaci�n de las tres especies. (Calle Pacheco et al., 2022)
Por su parte, la PCR en tiempo real (qPCR) o PCR cuantitativa es otra metodolog�a que ha ganado inter�s en el campo diagn�stico de la amebiasis debido a la optimizaci�n del tiempo empleado, la cuantificaci�n relativa del n�mero de par�sitos, y su alta sensibilidad. Adem�s, esta t�cnica reduce el riesgo de contaminaci�n, la principal causa de resultados falsos positivos en la amplificaci�n por PCR anidada. (Dacal et al., 2020) Esta t�cnica emplea cebadores y sondas marcadas que se hibridan con secuencias espec�ficas y luego se detectan y cuantifican a trav�s de la fluorescencia emitida despu�s de cada paso de amplificaci�n. (Calle Pacheco et al., 2022)
Por �ltimo, la PCR multiplexada, consiste en otra metodolog�a que permite la detecci�n de dos o m�s genes en una reacci�n �nica, optimizando la eficacia de detecci�n en comparaci�n con las reacciones individuales en paralelo. (Friesen et al., 2018) Desde que se invent� la PCR, se han desarrollado muchos m�todos de multiplexaci�n, comenzando con un sistema est�ndar de PCR de punto final con detecci�n de genes m�ltiples mediante una t�cnica externa, como electroforesis en gel o capilar. Posteriormente, se desarroll� la multiplexaci�n de qPCR utilizando sondas fluorescentes marcadas con diferentes fluor�foros y colorantes intercalados combinados con an�lisis de curvas de fusi�n (MCA). (Ibne Karim & Shantanu, 2021)
La innovaci�n de la PCR multiplex facilita la detecci�n simult�nea de E. histolytica, E. dispar y E. moshkovskii, aumentando la sensibilidad de la prueba incluso en muestras complejas y concentraciones m�nimas de 1000 par�sitos/0,05 g de heces. (Calle Pacheco et al., 2022)
La aplicaci�n de m�todos basados en la amplificaci�n de fragmentos de ADN para diagnosticar la amebiasis resolvi� el problema de diferenciar E. histolytica de otras especies, y determinar su prevalencia y diferencias gen�ticas. La PCR tiene mayor sensibilidad y especificidad que la microscop�a y la detecci�n de ant�genos y permite la detecci�n temprana de tratamiento oportuno. (Morio et al., 2018)
Nuevos hallazgos patol�gicos amebianos
La Organizaci�n Mundial de la Salud (OMS) estima que 500 millones de personas en todo el mundo pueden estar infectadas con Entamoeba, pero solo el 10% est�n infectados con E. histolytica, la cual es pat�gena. Por lo que, alrededor del 80-90% de las personas con amebiasis son asintom�ticos. En pacientes sintom�ticos, la severidad de la amebiasis est� influenciada por la gen�tica del paciente, el genotipo del par�sito, y la microbiota presente en el intestino del hospedador, estos factores contribuyen a la propagaci�n de E. histolytica, lo que lleva a inflamaci�n de la mucosa y da�o tisular. (Mulinge et al., 2021)
Los portadores asintom�ticos de E. histolytica desempe�an un papel importante en la propagaci�n del par�sito, y una infecci�n asintom�tica prolongada puede provocar amebiasis invasiva y abscesos hep�ticos amebianos. (Mahmood & Bakr, 2020) Las complicaciones intestinales (disenter�a) y extraintestinales (abscesos hep�ticos) se asocian con mortalidad, as� como el retraso en el diagn�stico de una infecci�n pat�gena puede aumentar la tasa de sepsis fatal. �(Xiao et al., 2019)
En los pa�ses desarrollados, el absceso hep�tico amebiano suele aparecer en migrantes y viajeros provenientes de �reas end�micas como Asia Meridional, �frica Sudoriental y Occidental, �frica Central y Am�rica del Sur), aunque varios casos aut�ctonos han sido reportados con poca frecuencia. Los cambios en la inmunidad celular podr�an aumentar la probabilidad de enfermedad invasiva y esto ocurre principalmente en hombres de entre 30 y 50 a�os.� (Bernet S�nchez et al., 2020) Las manifestaciones cl�nicas aparecen unos meses despu�s de haber regresado de un �rea end�mica, pero algunos casos han sido reportados varios a�os e incluso varias d�cadas despu�s la exposici�n. (Bernet S�nchez et al., 2020) Los principales s�ntomas informados por los pacientes fueron fiebre y dolor abdominal localizado en el cuadrante superior derecho, sin embargo, el dolor puede ser pleur�tico y/o irradiarse al epigastrio, t�rax o brazo derecho. La hepatomegalia tambi�n es un signo importante, acompa�ado de sensibilidad a la palpaci�n, tos, sudoraci�n, malestar general y p�rdida de peso. (Mahmood & Bakr, 2020)
Se ha documentado que E. dispar tiene una capacidad nula para actuar como agente pat�geno par�sito, a excepci�n de la cepa brasile�a cultivada en presencia de bacterias intestinales comunes, capaces de causar da�o hep�tico. (Soares et al., 2019)
Conclusiones
La diferenciaci�n de Entamoebas histolytica, dispar y moshkovskii mediante varias metodolog�as de PCR han demostrado ser pruebas diagn�sticas con alta eficacia, que superan por mucho a la microscop�a utilizada habitualmente, dada la incapacidad de la microscop�a convencional para diferenciar entre E. histolytica pat�gena y los miembros no pat�genos del complejo Entamoeba, es de vital importancia el conocimiento de los ensayos de PCR descritos en este estudio, ya que su aplicaci�n como herramienta alternativa en el diagn�stico de rutina y en los estudios epidemiol�gicos de la amebiasis proporcionar�n datos m�s precisos y un mayor conocimiento de las infecciones por estas amebas en humanos. Como tal, la detecci�n molecular de par�sitos mediante PCR podr�a considerarse el est�ndar de oro para el diagn�stico debido a su alta sensibilidad, especificidad y capacidades sensibles al costo y tiempo en comparaci�n con las t�cnicas convencionales mencionadas anteriormente.
Con respecto a los hallazgos patol�gicos, se estima que esta tem�tica va de la mano con la metodolog�a diagn�stica de inicio, que posteriormente podr� conjugarse con estudios m�s profundos que permitan el reconocimiento de afecciones extraintestinales no documentadas hasta el momento, y que dar�an paso a la extensi�n del espectro terap�utico de la amebiasis. Es por eso que se evidencia la necesidad de mejorar la descripci�n general de la epidemiolog�a y el diagn�stico de la amebiasis, as� como la informaci�n sobre la distribuci�n y dispersi�n actual de diferentes formas cl�nicas y la comprensi�n de sus relaciones evolutivas, ya que son de utilidad� para la predicci�n futura de patrones de transmisi�n, lo cual permitir� tambi�n identificar nuevos hallazgos patol�gicos y poder disminuir la tasa de mortalidad por complicaciones en especial extraintestinales como es el caso del absceso hep�tico, o a su vez la afecci�n intestinal ocasionada por la variaci�n de cepas no pat�genas, as� como las infecciones con coexistencia de varios g�neros de entamoebas.
. histolytica utilizan m�todos moleculares para proporcionar datos mucho m�s precisos.
Referencias
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� 2022 por los autores. Este art�culo es de acceso abierto y distribuido seg�n los t�rminos y condiciones de la licencia Creative Commons Atribuci�n-NoComercial-CompartirIgual 4.0 Internacional (CC BY-NC-SA 4.0)
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