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Evaluaci�n de la actividad cicatrde la hoja planta del aire (bryophyllum pinnatum) en cortaduras inducidas en ratas (rattus norvegicus)

 

Evaluation of the healing activity of the air plant (Bryophyllum pinnatum) leaf on cuts induced in rats (Rattus norvegicus)

 

Avalia��o da atividade cicatrizante da folha da planta a�rea (Bryophyllum pinnatum) em cortes induzidos em ratos (Rattus norvegicus)

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Correspondencia: stalin.rojas@espoch.edu.ec

 

Ciencias de la Salud

Art�culo de Investigaci�n

 

 

* Recibido: 13 de mayo de 2025 *Aceptado: 21 de junio de 2025 * Publicado: �11 de julio de 2025

 

          I.            Escuela Superior Polit�cnica de Chimborazo (ESPOCH), Facultad de Ciencias, Carrera Bioqu�mica y Farmacia, Grupo de Investigaci�n de Biom�dica, Tecnolog�a y Atenci�n Farmac�utica del Ecuador "(GIBTAFEC), Riobamba, Ecuador.

        II.            Escuela Superior Polit�cnica de Chimborazo (ESPOCH), Facultad de Ciencias, Carrera Bioqu�mica y Farmacia, Grupo de Investigaci�n de Biom�dica, Tecnolog�a y Atenci�n Farmac�utica del Ecuador "(GIBTAFEC), Riobamba, Ecuador.

      III.            Escuela Superior Polit�cnica de Chimborazo (ESPOCH), Facultad de Ciencias, Carrera Bioqu�mica y Farmacia, Grupo de Investigaci�n de Biom�dica, Tecnolog�a y Atenci�n Farmac�utica del Ecuador "(GIBTAFEC), Riobamba, Ecuador.

      IV.            Farmacia Cruz Azul Rumi�ahui, Atenci�n farmac�utica en farmacia privada, Investigadora externa. P�llaro, Ecuador.

        V.            Investigadora externa, Riobamba, Ecuador.

Resumen

El problema de salud que afecta a personas de todas las edades pueden variar en gravedad y complejidad, dependiendo del tipo de herida, su ubicaci�n y la salud general de la persona. El objetivo del presente trabajo experimental fue evaluar la actividad cicatrizante que presenta la hoja de Bryophyllum Pinnatum en Rattus norvegicus. El tipo de investigaci�n fue experimental transversal prospectivo, pues se realiz� control de calidad de la materia seca, en donde identificaron cualitativamente y cuantitativamente los metabolitos secundarios. Se utiliz� 30 ratas asignados en 6 grupos experimentales que son: grupo A (sin tratamiento), grupo est�ndar medicamento 1 con Sulfadiazina de plata al 2% (B), grupo de medicamento 2 con MEBO 0,25% (C) y los tres grupos experimentales (D, E y F) a 25%, 50%, 75%. Los resultados obtenidos en control de calidad y control microbiol�gico que se realiz� a la muestra cumple con los par�metros que se establecen tanto en la USP 35 como en la norma NTE INEN 2392: 2007, adem�s las hojas Bryophyllum Pinnatum los metabolitos de mayor importancia en el extracto son flavonoides y taninos. El tratamiento se aplic� por v�a t�pica el gel en la parte dorsal de la rata cada doce 12 horas durante 21 d�as, se medi� el tiempo de cicatrizaci�n tanto como el ancho y la longitud de la herida hasta el desprendimiento de la costra. Se concluye que el tratamiento con extracto al 75% tiene una alta actividad cicatrizante con duraci�n de 9.2 d�as.

Palabras clave: actividad; cicatrizaci�n; tratamiento; aplicaci�n; concentraciones; terap�utica; t�pica; cuantificaci�n.

 

Abstract

Health problems affecting people of all ages can vary in severity and complexity depending on the type of wound, its location, and the individual's overall health. The objective of this experimental study was to evaluate the healing activity of Bryophyllum Pinnatum leaves on Rattus norvegicus. The research was conducted in a prospective, cross-sectional manner, as dry matter quality control was performed, where secondary metabolites were qualitatively and quantitatively identified. Thirty rats were assigned to six experimental groups: group A (no treatment), standard drug group 1 with 2% silver sulfadiazine (B), drug group 2 with 0.25% MEBO (C), and the three experimental groups (D, E, and F) at 25%, 50%, and 75%. The results obtained in quality control and microbiological control that was performed on the sample comply with the parameters established in both USP 35 and the NTE INEN 2392: 2007 standard, in addition to the Bryophyllum Pinnatum leaves, the most important metabolites in the extract are flavonoids and tannins. The gel was applied topically to the rat's back every 12 hours for 21 days. Healing time was measured, including wound width and length until the scab fell off. It was concluded that treatment with the 75% extract had high wound healing activity, lasting 9.2 days.

Keywords: activity; healing; treatment; application; concentrations; therapeutics; topical; quantification.

 

Resumo

Problemas de sa�de que afetam pessoas de todas as idades podem variar em gravidade e complexidade dependendo do tipo de ferida, sua localiza��o e a sa�de geral do indiv�duo. O objetivo deste estudo experimental foi avaliar a atividade de cicatriza��o das folhas de Bryophyllum Pinnatum em Rattus norvegicus. A pesquisa foi conduzida de forma prospectiva e transversal, uma vez que foi realizado o controle de qualidade da mat�ria seca, onde os metab�litos secund�rios foram identificados qualitativa e quantitativamente. Trinta ratos foram alocados em seis grupos experimentais: grupo A (sem tratamento), grupo de droga padr�o 1 com 2% de sulfadiazina de prata (B), grupo de droga 2 com 0,25% de MEBO (C) e os tr�s grupos experimentais (D, E e F) a 25%, 50% e 75%. Os resultados obtidos no controle de qualidade e controle microbiol�gico realizado na amostra est�o de acordo com os par�metros estabelecidos tanto na norma USP 35 quanto na norma NTE INEN 2392:2007, al�m das folhas de Bryophyllum Pinnatum, os metab�litos mais importantes no extrato s�o os flavonoides e os taninos. O gel foi aplicado topicamente no dorso do rato a cada 12 horas, durante 21 dias. O tempo de cicatriza��o foi medido, incluindo a largura e o comprimento da ferida, at� a queda da crosta. Concluiu-se que o tratamento com o extrato a 75% apresentou alta atividade cicatrizante, com dura��o de 9,2 dias.

Palavras-chave: atividade; cicatriza��o; tratamento; aplica��o; concentra��es; terap�utica; t�pico; quantifica��o.

 

Introducci�n

En Ecuador, las plantas medicinales han constituido uno de los principales recursos existentes que se usan en el �mbito de la medicina tradicional. Dado el conocimiento ancestral y su grado de extensi�n, estos vegetales se utilizan tanto en las poblaciones urbanas y rurales. Tradicionalmente, la cultura ecuatoriana ha utilizado las hierbas por sus propiedades medicinales, entre ellas las hierbas calientes, hierbas fr�as, hierbas medicinales y nutritivas. Las hojas machacadas se pueden utilizar en heridas, dislocaciones, etc. Se utiliza como curita o extracto; ayuda en la recuperaci�n. (Jim�nez et al. 2023, p. 27)

Los medicamentos a base de plantas tienen espectro terap�utico, menos efectos secundarios, menos toxicidad y, en general, causan menos efectos secundarios que los medicamentos farmac�uticos, lo que las hace m�s seguras y costosas, como se usan para la atenci�n m�dica b�sica, el pa�s puede ahorrar dinero en facturas m�dicas. Hace tiempo que los investigadores y los m�dicos trabajan para mejorar los tratamientos de las heridas y acelerar su cicatrizaci�n. (M�s Toro et al. 2017, p. 1-9)

Cada a�o, cientos de miles de personas sufren quemaduras, cirug�as o da�os en los tejidos a causa de diversos accidentes. En todos los casos, las heridas requirieron un tratamiento seguro e inmediato, lo que representa un desaf�o terap�utico. La piel es el �rgano m�s grande del cuerpo humano. Act�a como barrera protectora de los �rganos internos, protege contra temperaturas extremas, productos qu�micos y microorganismos, y mantiene un equilibrio homeost�tico. Sin embargo, es vulnerable a roturas en su estructura que resultan en lesiones. (Yeung et al. 2018, p. 865-891)

Una herida es una lesi�n accidental o intencional en la piel. Es un problema de salud que afecta a personas de todas las edades y causa una alta morbilidad y mortalidad. El proceso de cicatrizaci�n de las heridas de la piel depende de una variedad de factores, como mediadores sist�micos, tipo de herida, estado nutricional y enfermedad subyacente, que determinan el desarrollo normal o anormal del proceso fisiol�gico. Actualmente, existen tratamientos para promover la cicatrizaci�n de heridas, enfoc�ndose en la aplicaci�n de autoinjertos, aloinjertos, vendajes, col�geno, �cido hialur�nico y factores de crecimiento. (�Principios en t�cnicas de suturas de piel� 2018, p. 65-76)

 

 

 

 

 

 

 

 

Metodolog�a

Descripci�n de los procesos

Figura 1:� Descripci�n del proceso general

 

Normas y Enfoque

Normas de la investigaci�n

Las normas que se emple� en la investigaci�n es la Farmacopea de los Estados Unidos USP 35 NF (�USP 35�NF 30 | USP-NF� 2011) juntamente con la Farmacopea Espa�ola (�Real Farmacopea Espa�ola� 2011) , documentaci�n relacionada con el tema M�todos de an�lisis de materia org�nica extra�a. y la Norma T�cnica Ecuatoriana NTE INEN 2 392:2007. Hierbas arom�ticas, en el apartado de requisitos establecidos f�sicos � qu�micos. (Instituto Ecuatoriano de Normalizaci�n (INEN) 2007)

 

Enfoque de la investigaci�n

La investigaci�n con enfoque mixto, ya que es la combinaci�n del enfoque cualitativo porque se centra en la observaci�n e interpretaci�n de los resultados y enfoque cuantitativo se basa en la recolecci�n y an�lisis de datos para analizar y describir si existen diferencias entre los grupos de tratamiento utilizando m�todos estad�sticos para extraer las respectivas conclusiones.

Alcance de la investigaci�n

La investigaci�n con un alcance exploratorio esta fase de investigaci�n implica investigar y comprender los posibles efectos y beneficios del extracto en diferentes concentraciones. Esto puede ser �til para determinar la dosis �ptima de tratamiento que permita la administraci�n de las incisiones durante el proceso de cicatrizaci�n en ratas en diferentes grupos de tratamiento junto con el grupo de control.

Dise�o de la investigaci�n

Se utiliz� un dise�o experimental. se caracteriza porque se manipula la variable independiente y se analiza los efectos de la variable dependiente. Se utilizaron para el estudio animales de experimentaci�n (Rattus norvegicus) los mismos que fueron asignados de forma aleatoria que cumplieron diferentes criterios de inclusi�n para hacer la muestra lo m�s homog�nea posible.

Tipo de investigaci�n

Este tipo de investigaci�n es experimental prospectivo, en la que se realiz� una evaluaci�n terap�utica mediante el ensayo de mediciones constantes en el transcurso de un per�odo corto de tiempo, lo cual permiti� determinar la actividad cicatrizante en ratas en concentraciones bajas, medias y altas del extracto obtenido de las hojas de Bryophyllum pinnatum.

 

Resultados y discusi�n�

Control de calidad de la materia vegetal (Bryophyllum pinnatum)

Estas determinaciones son importantes para evaluar las condiciones sanitarias e higi�nicas de la droga cruda y se lo realiz� considerando los par�metros de organismos encargados de asegurar la calidad de productos farmac�uticos.

An�lisis fisicoqu�mico

Los ensayos fueron realizados por triplicado, con el fin de obtener resultados m�s fiables

 

 

Determinaci�n de humedad

Asegura que la materia vegetal cumple con los est�ndares de calidad establecidos y es la cantidad de agua libre que se encuentra contenida en la materia vegetal, por lo que requiere una adecuada conservaci�n para evitar el crecimiento de microorganismos, la degradaci�n de los principios activos y la alteraci�n de las propiedades organol�pticas del material vegetal. (Mart�nez 2012, p. 28-58)

 

Tabla 1:� Determinaci�n de Humedad de la materia vegetal de las hojas de Bryophyllum pinnatum

 

En la Tabla 1 se muestran los resultados del porcentaje de humedad de las hojas secas de Bryophyllum pinnatum, obteniendo un porcentaje de 7.48% donde se observa el valor promedio se encuentra dentro de los valores de referencia establecido en la norma t�cnica ecuatoriana INEN 2 392:2017 y en la Farmacopea de los Estados Unidos USP 35.

Es un factor de calidad que nos indica que la planta ha sido bien cuidada, evitando as� el crecimiento microbiano y la degradaci�n del material vegetal. La humedad depende directamente del secado de la materia prima. El valor resultante se encuentra dentro del rango de referencia, lo que indica unas condiciones adecuadas de almacenamiento y conservaci�n; el contenido de humedad proporciona informaci�n sobre la estabilidad de la materia prima. Cuanta menos agua quede, menos bacterias y hongos se multiplicar�n. (Yeung et al. 2018, p. 25).

En Colombia 2022, se realiz� un estudio sobre �Contribuci�n a la estandarizaci�n de un extracto citot�xico rico en flavonoides de la hoja del aire (Bryophyllum pinnatum)�, determinando que esta planta se caracteriza por tener una alta retenci�n del agua principalmente en las hojas, por lo que al evaluar la humedad promedio del material vegetal fue de 10,01%, confirmando un buen procesamiento durante el secado de la planta, concordando con los resultados reportados en este estudio. (Villareal y Robles, 2022, p. 8).

Determinaci�n de cenizas

Representan el contenido en sales minerales o en materia inorg�nica de la droga. En condiciones rigurosas, es constante y nos permite descubrir falsificaciones por otras drogas, tierras u otros minerales. (Mart�nez 2012, p. 28-58)

 

Tabla 2 Determinaci�n de Cenizas de la materia vegetal de las hojas de Bryophyllum pinnatum

 

En la Tabla 2, �se muestran los resultados del porcentaje de cenizas totales con un porcentaje de 11,6%, cenizas solubles en agua de 5.6% y cenizas insolubles de HCL de 2,7% donde se observa el valor promedio se encuentra dentro de los valores de referencia establecido en la norma t�cnica ecuatoriana INEN 2 392:2017 y en la Farmacopea de los Estados Unidos USP 35.

La determinaci�n de cenizas totales se refiere al contenido de residuos, lo que indica la ausencia de minerales excesivos. Para el an�lisis, las cenizas solubles en agua representan las cenizas totales y principalmente metales pesados, y las cenizas insolubles en HCl miden si los minerales son responsables de ciertos efectos farmacol�gicos. Si el resultado supera los l�mites de referencia, indica que las hojas de la planta est�n contaminadas con residuos de tierra, polvo e incluso pesticidas. Los resultados que figuran en la tabla garantizan la calidad de la droga vegetal. (Jagdish y Nehra 2022, p. 7)

En Ecuador 2020, se llev� a cabo un estudio sobre �An�lisis de la eficacia del extracto de Bryophyllum pinnatum como conservante en una emulsi�n cosm�tica�, donde se realiz� el an�lisis fisicoqu�mico cuantitativo, obteniendo 11,8% de cenizas totales, lo que indica un estado de pureza del material vegetal al estar libre de contaminantes como tierra o arena, concordado con los resultados obtenidos en esta investigaci�n. (Tinoco y Verdesoto, 2020, p. 24).

Tamizaje fitoqu�mico del extracto de las hojas de Bryophyllum pinnatum

El an�lisis fitoqu�mico tuvo como objetivo identificar cualitativamente los metabolitos secundarios representativos responsables del efecto farmacol�gico. Estos grupos qu�micos justifican un estudio m�s profundo de sus efectos cicatrizante �In Vivo�. Las hojas de las plantas se utilizan porque contienen muchas sustancias de reserva, pigmentos, fibras y vitaminas. Son los �rganos de las plantas m�s utilizados con fines medicinales.

 

Tabla 3.� Tamizaje fitoqu�mco de los extractos de las hojas de Bryophyllum pinnatum

 

El tamizaje fitoqu�mico es uno de los pasos que permite describir cualitativos los principales grupos de sustancias qu�micas presentes en una planta. El conocimiento adquirido a trav�s del proceso de investigaci�n sobre compuestos de origen vegetal permite comprender la fisiolog�a y la bioqu�mica de los organismos que los producen y aprovecharlos al m�ximo, cient�fica, m�dica y econ�micamente. (S�nchez 2006, p. 125-160)

Los resultados obtenidos se pueden encontrar en la Tabla 3. Muestra la presencia de alcaloides, cumarinas y grupos lact�nicos, terpenos y esteroides, catequinas, az�cares reductores, taninos, flavonoides, saponinas, quinonas y mucilagos. Pero solo en disolvente alcoh�lico, puede extraer taninos y flavonoides juntos, lo cual es importante debido a estos dos los metabolitos son esenciales para el desarrollo de la actividad cicatrizante.

La prueba de Sudan confirm� la ausencia de compuestos aceitosos, ya que no se form� ning�n precipitado ni pel�cula roja en las paredes del tubo. La prueba de Liberman-Burchard consta de dos etapas; Esto significa que es buena para los terpenos y los esteroides. Las conclusiones anteriores son consistentes con los resultados del estudio de (Aejazuddin et al. 2011, p. 1-5), se dice que las partes a�reas de la especie Kalanchoe pinnata contienen altos niveles de β-sitosterol, un compuesto esteroide (fitosterol) que tiene efectos antioxidantes, antiinflamatorios y curativos y puede actuar como humectante de la piel.

Se encontr� que los alcaloides eran moderadas en los tres tipos de extractos. A trav�s del ensayo de Dragendorff, Mayer y Wagner. Similar a lo que dijeron (Ebere Okwu y Uchenna Nnamdi 2011, p. 1456-1461), quienes afirman que las hojas contienen varios alcaloides con funciones importantes. Por ejemplo, el alcaloide fenantreno identificado como 1-etanamino-7-hex 1-.yne-5-ona es una potente sustancia aislada del extracto etan�lico de hojas de Bryophyllum pinnatum y un agente antimicrobiano, inhibidor de P. aeruginosa, K. pneumonia, S. aureus, E. coli, C. albicans y A. niger. Con base en estos resultados, se considera esta planta para su uso en el campo de la fitomedicina para prevenir enfermedades y tratar infecciones.

Sus propiedades cicatrizantes se deben a la presencia de taninos y flavonoides que act�an como antioxidantes. La prueba de cloruro f�rrico en el extracto alcoh�lico y acuoso revel� un azul intenso, indicando la presencia de taninos, y la prueba de Shinoda determin� la presencia de flavonoides y fue mencionado por (V�lchez C�ceda et al. 2020, p. 8). Los compuestos fen�licos contienen flavonoides, los taninos ayudan al proceso de cicatrizaci�n de heridas.

Control de calidad del extracto etan�lico de las hojas de Bryophyllum pinnatum

Al realizar una evaluaci�n completa de los par�metros mencionados, se asegur� que el extracto cumpla con los requisitos establecidos y sea apto para su uso, asegurando que el producto final cumpla con los est�ndares de calidad establecidos.

Caracter�sticas organol�pticas

 

Tabla 4:� Caracter�sticas organol�pticas del extracto etan�lico de las hojas de Bryophyllum pinnatum

 

El extracto etan�lico presento caracter�sticas organol�pticas espec�ficas seg�n el disolvente utilizado. Con un olor penetrante fuerte propia de la hoja y poco agradable, color verde intenso, aspecto l�quido y sabor amargo, probablemente debido a los compuestos disueltos. Estas caracter�sticas no se pueden referenciar y comparar porque son propias de la planta.

Determinaci�n de los par�metros f�sico - qu�mica

 

Tabla 5:� Caracter�sticas f�sicos - qu�micas del extracto etanolico de las hojas de Bryophyllum pinnatum

 

En la Tabla 5, las propiedades fisicoqu�micas del extracto etan�lico de hojas de Bryophyllum pinnatum fueron bien caracterizadas. El �ndice de refracci�n del extracto etan�lico fue de 1,36 que es igual que el valor del �ndice de refracci�n del etanol (n = 1,36). Seg�n (Rodr�guez y Moran 2008, p. 15) menciona que en el extracto hay la presencia de compuestos disueltos, que podr�an ser metabolitos activos o inactivos.

Por otro lado, el pH del extracto es �cido con un valor de 5,90, lo que tambi�n puede explicar la raz�n de esto las propiedades qu�micas de algunos metabolitos secundarios disueltos como flavonoides, fenoles, taninos, esteroides y triterpenos. En el estudio de (Cucur� Pushug 2017, p. 50), el pH del extracto etan�lico de 96% de hojas de la especie K. pinnata fue de 2,55 en comparaci�n con el pH muy �cido del extracto utilizado en este estudio, lo que se debe a esta diferencia que existe entre las concentraciones.

La densidad relativa fue de 0,814 g/ml, superior a la del disolvente utilizado (alcohol et�lico al 96 %), que ten�a una densidad de 0,8 g/ml. Este valor indica que el extracto contiene sustancia disuelta de la droga cruda. (Rodr�guez y Moran 2008, p. 10)

El resultado fue un valor de s�lidos totales de 1,06%, lo que indica la presencia de metabolitos disueltos; ya que cuanto mayor sea el valor, mayor ser� el n�mero de compuestos disueltos que puede contener. (Rodr�guez y Moran 2008, p. 11)

Cromatograf�a de capa fina TLC

La cromatograf�a de capa fina se basa en la preparaci�n de una capa, uniforme, de un adsorbente mantenido sobre una placa de aluminio u otro soporte con 2 fases, la fase m�vil es l�quida y la fase estacionaria en un s�lido. Con la realizaci�n de cromatograf�a de capa fina (TLC), se pretende determinar los posibles compuestos que se hallan disueltos en el extracto del vegetal. (Walton y Reyes 2021, p. 613-638)

An�lisis cromat�grafo para flavonoides totales

Se realiz� una cromatograf�a para separar los diferentes componentes de un extracto vegetal complejo seg�n sus diferentes afinidades por la fase estacionaria y la fase m�vil. Esto es importante para la identificaci�n y caracterizaci�n de los compuestos individuales presentes en el extracto. (Walton y Reyes 2021, p. 613-638)

 

 

 

Tabla 6:� Cromatograf�a de capa fina de Flavonoides

Realizado por: Dami�n K.,2024

 

Se presentan los resultados obtenidos por cromatograf�a y se muestran los posibles compuestos debidos a la presencia de flavonoides en la planta Bryophyllum pinnatum, el color var�a del amarillo al amarillo verdoso o verde. Seg�n (Wagner y Bladt 1996, p. 25-150)� el Rf calculado fue 0,52, posiblemente debido al compuesto de Timol observado, Rf = 0,70 Quercetina y Rf = 0,90 �cido cafeico - �cido fer�lico, para verificar la presencia de estos flavonoides comparando los ejemplos de Rf en el libro de Wagner el rango estable de estos compuestos es Timol Rf = 0,52 correspondiente a un color amarillo claro, Quercetina 0,70 a 0,80 correspondiente a un color amarillo verdoso y �cido cafeico - �cido fer�lico 0,9 a 0,95 correspondiente a un color verde.

Para realizar el an�lisis cromatogr�fico del extracto acuoso de Bryophyllum pinnatum es recomendable el uso de est�ndares como rutina (Rf=0,4) y quercetina (Rf=1), por lo que, en un estudio realizado por la Universidad Javeriana, se determin� la presencia de 14 flavonoides (coloraci�n amarilla-naranja), siendo los compuestos mayoritarios el flavonol y kaempferol. (Villareal y Robles, 2022, p. 8).

En Ecuador 2018, se llev� a cabo un estudio sobre �Determinaci�n de la actividad antiinflamatoria de Kalanchoe pinnata mediante inhibici�n de edema plantar inducido por carragenina en ratas (Rattus norvegicus)� y considerando que la planta posee diversos componentes activos como fenoles, flavonoides y �cidos, se realiz� el an�lisis cromatogr�fico en capa fina de flavonoides usando una fase m�vil de etilo-�cido f�rmico- �cido ac�tico glacial- agua (100:11:11:26) y se determin� presencia de flavonoides por su coloraci�n de amarillo a verde con� (Rf= 0,43; 0,59 y 0,77), que le confieren a la planta las propiedades antiinflamatorias y cicatrizantes. (Cucur�, 2018, p. 37).��

An�lisis cromat�grafo para taninos totales

Se realiz� una cromatograf�a para separar los diferentes componentes de un extracto vegetal complejo seg�n sus diferentes afinidades por la fase estacionaria y la fase m�vil. Esto es importante para la identificaci�n y caracterizaci�n de los compuestos individuales presentes en el extracto. (Criollo Chaglla 2015, p. 75)

En la Tabla 7, presenta el resultado de la cromatograf�a del extracto de las hojas de Bryophyllum pinnatum con la fase m�vil empleada y su revelador para la determinaci�n de los taninos:

 

Tabla 7:� Cromatograf�a en capa fina de taninos

Realizado por: Dami�n K.,2024

 

Los resultados obtenidos por cromatograf�a y se muestran los posibles compuestos debidos a la presencia de taninos en la planta Bryophyllum pinnatum, el color var�a del casta�o oscuro al amarillo. Seg�n (Wagner y Bladt 1996, p. 200-300) el Rf calculado fue 0,26 posiblemente debido al compuesto de Acetato de bornilo y Alcoholes terpenicos observado, Rf = 0,78 �cido clorog�nico y Rf = 0,91 �cido clorog�nico, para verificar la presencia de taninos comparando los ejemplos de Rf en el libro de Wagner el rango estable de estos compuestos es Acetato de bornilo y Alcoholes terpenicos correspondiente a un color Verde azul y �cido clorog�nico 0.75 � 0.95 �correspondiente a un color amarillo a Marr�n

Cuantificaci�n por espectrofotometr�a UV-V

Los resultados obtenidos mediante la espectrofotometr�a UV-Vis proporcionan informaci�n cuantitativa precisa sobre la concentraci�n de una sustancia en una muestra que es expuesta a una fuente de luz UV-Vis, las mol�culas de la sustancia presente en la muestra absorben parte de esa luz. (Villarreal Romero, Robles y Costa 2022, p. 108-110)

An�lisis cuantitativo de flavonoides totales expresados como Quercetina

Para determinar la cantidad de flavonoides, se prepararon curvas de calibraci�n utilizando diferentes concentraciones de Quercetina como est�ndar y se ley� el extracto de hojas de Bryophyllum pinnatum a una longitud de onda de 420 nm.

 

Figura 2: Curva de calibraci�n de la absorbancia vs concentraci�n del est�ndar Quercetina para cuantificaci�n de flavonoides totales en muestra seca

 

La curva de calibraci�n de quercetina se cre� con concentraciones de 10, 20, 30, 40 ppm y obtenemos la siguiente ecuaci�n de la recta: Y= 2,761624x + 5,939463 con el coeficiente de correlaci�n de 0.99867. Esta ecuaci�n se utiliz� para determinar la concentraci�n total de flavonoides en el extracto etan�lico de Bryophyllum pinnatum utilizando datos de absorbancia obtenidos mediante espectrofotometr�a del extracto. Los resultados obtenidos se expresaron como mg de Quercetina equivalente/ g de materia seca.

Evaluaci�n de la Actividad Cicatrizante del extracto etan�lico de las hojas de Bryophyllum pinnatum

La determinaci�n de la actividad cicatrizante del extracto etan�lico de hojas de Bryophyllum pinnatum se realiz� mediante la preparaci�n de un gel. La investigaci�n se realiz� en 30 ratas (Rattus norvegicus), divididas en 6 grupos de 5 ratas (Rattus norvegicus), se trabaj� con grupos est�ndares y 3 formulaciones

El tratamiento se aplic� de forma t�pica cada 12 horas hasta la cicatrizaci�n de la herida; se evaluaron la longitud, el ancho de la lesi�n, la formaci�n y desprendimiento de la costra y el tiempo de cicatrizaci�n.

Variaci�n del tama�o de las heridas en el proceso experimental de cicatrizaci�n

Longitudes de las heridas (cm) en ratas Rattus norvegicus

 

Tabla 7: Promedio de longitudes de las heridas (cm) en ratas Rattus norvegicus

 

Figura 3: Longitud de heridas vs Tiempo

 

La Tabla 7, reporta el promedio de las mediciones longitudinales para una herida inducida. Los procesos de recuperaci�n de los grupos (A, B, C, D, E y F) se registraron diariamente. Al final del tratamiento, las mediciones se realizaron a nivel de la herida de 0 cm, sin inflamaci�n ni irritaci�n, en todos los modelos experimentales.

La figura 3, �muestra el cierre longitudinal y el tiempo requerido para el proceso de cicatrizaci�n con base en estos datos, se puede concluir que el mejor tratamiento es para el grupo F. Se trat� con el gel a 75% de extracto de Bryophyllum Pinnatum que tom� menos tiempo en cicatrizar. Los grupos con mayor tiempo de cicatrizaci�n fueron A (control en blanco) que no recibieron ning�n tratamiento y B (grupo con medicamento) se utiliz� la Sulfadiazina de plata.

En Ecuador 2022, se llev� a cabo un estudio sobre �Evaluaci�n de la actividad cicatrizante de Kalanchoe pinnata en ratones (Mus musculus)�, obteniendo resultados similares a esta investigaci�n ya que se evalu� la longitud de las heridas en los ratones, la cual fue de 1,5 cm en todos los grupos de estudio y al final el tratamiento desapareci� la herida (0 cm) al estar libre de inflamaci�n e irritaci�n, sin embargo, el gel de 300 ppm cicatriz� r�pidamente la herida en 9 d�as, ya que se redujo la longitud de la herida en un promedio de 0,2 cm por d�a. (Bayas Sanchez 2022, p. 74)

Tiempo de cicatrizaci�n de las heridas (d�as) en los grupos experimentales

 

Tabla 8:� Tiempo de cicatrizaci�n de las heridas (d�as) en los grupos experimentales

 

El an�lisis de los datos de los d�as de cicatrizaci�n que se muestran en la Tabla 8, revel� que el mejor tratamiento para el proceso de cicatrizaci�n de la herida fue el grupo F, que se trat� con gel de extracto de B. pinnatum al 75 % durante un promedio de 9,2 d�as, seguido por el grupo C que fue tratado con el medicamento 2 (MEBO 0.25%) con un promedio de 10 d�as� para la cicatrizaci�n de las heridas, El tratamiento del grupo E con gel con extracto de B. pinnatum al 50 % se realiz� durante 13,4 d�as, seguido del tratamiento con gel correspondiente con extracto de B. pinnatum al 25 % durante 15.6 d�as. En comparaci�n, el grupo B (medicamento 2) utiliz� sulfadiazina de plata al 1% durante 16.6 d�as y el grupo A (sin tratamiento) requiri� 20,6 d�as.

Observamos que el grupo E se trata con gel a base de extracto etan�lico de Bryophyllum pinnatum al 75% fue �ptimo, ya que la cicatrizaci�n completa se produjo en 9,2 d�as. Comparando con un estudio de la especie Kalanchoe pinnata con la crema acuosa al 6% de hojas de K. pinnata de (Coutinho et al. 2021, p. 6034-6039) se concede un per�odo de recuperaci�n de 10 d�as, con el siguiente per�odo de cicatrizaci�n no mostr� ning�n cambio significativo.

El medicamento Ung�ento herbal MEBO 0,25 % β-sitoesterol act�a directamente en las heridas regenerando y reparando el tejido de la piel, su fase de cicatrizaci�n fue de 10 d�as, su acci�n cicatrizante es similar al del gel con el extracto a 75%, solo se diferencia por 1 d�a. Se estima que una de las razones es que la planta estudiada tambi�n presenta fitoesteroles como el βsitoesterol, el cual es el componente principal del ung�ento y por lo tanto ayuda a cicatrizar herida. (Aejazuddin et al. 2011, p. 5)

El gel preparado con el 50% de extracto etan�lico Bryophyllum pinnatum de tard� 13,4 d�as en endurecerse. Tiempo que demostr� en un estudio con el extracto etan�lico de K. pinnata tiene potencial curativo a la misma concentraci�n en el d�a 11, este tratamiento fue del 86,3% y, por lo tanto, m�s eficaz que el control positivo. (Bayas Sanchez 2022, p. 76)

El grupo D, tratado con gel que conten�a el 25% de extracto etan�lico de Bryophyllum pinnatum, fue un despu�s del per�odo de recuperaci�n de 15.6 d�as, vemos que pasan m�s d�as debido a la baja tasa concentraci�n del extracto utilizado para el tratamiento.

Finalmente, el grupo A (blanco) hace referencia a que no se utiliz� ning�n tipo de tratamiento el tratamiento y en cierto modo el tiempo de cicatrizaci�n fue de 20.6 d�as. Por otro lado, el grupo B (Medicamento) fue tratado con Sulfadiazina de plata y dur� 16.6 d�as, hubo 5 d�as de diferencia en la cicatrizaci�n de la herida en el grupo A.

En Brasil 2022, se realiz� un an�lisis sobre �Efecto del extracto acuoso de hojas de Kalanchoe pinnata en la cicatrizaci�n de heridas en la piel en ratas Wistar�, donde se evalu� el tiempo de cicatrizaci�n en 20 ratas (Rattus norvergicus), observando que a partir del d�a 9 hubo un gran avance en el proceso de reepitelizaci�n del grupo experimental y control positivo, mientras que el blanco tuvo un tiempo promedio de cicatrizaci�n de la herida de 17 d�as, adem�s, se evidenci� que a una mayor concentraci�n del gel se reduc�a el tiempo de cicatrizaci�n, lo cual concuerda con los datos reportados en esta investigaci�n (Da Silva et al., 2022, p. 6).

 

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