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Utilidad cl�nica de reacci�n de cadena polimerasa en tiempo real al diagn�stico de pacientes afectados por COVID-19
Clinical utility of real-time polymerase chain reaction in the diagnosis of patients affected by COVID-19
Utilidade cl�nica da rea��o em cadeia da polimerase em tempo real no diagn�stico de pacientes afetados pela COVID-19
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Correspondencia: campozano-dannes8402@unesum.edu.ec
Ciencias de la Salud
Art�culo de Investigaci�n
* Recibido: 30 de diciembre de 2023 *Aceptado: 03 de enero de 2024 * Publicado: �15 de febrero de 2024
I. Licenciado en Laboratorio Cl�nico, Instituto de Posgrado del Programa de Maestr�a Ciencias en Laboratorio Cl�nico, Universidad Estatal del Sur de Manab�, Jipijapa, Ecuador.
II. Licenciada en Laboratorio Cl�nico, Instituto de Posgrado del Programa de Maestr�a Ciencias en Laboratorio Cl�nico, Universidad Estatal del Sur de Manab�, Jipijapa, Ecuador.
III. �Licenciada en Laboratorio Cl�nico, Instituto de Posgrado del Programa de Maestr�a Ciencias en Laboratorio Cl�nico, Universidad Estatal del Sur de Manab�, Jipijapa, Ecuador.
IV. Odont�loga, Mag�ster en Dise�o Curricular, Doctora en Ciencias de la Salud PhD, Perito Forense del Consejo de Judicatura del Ecuador, Tutora Revisora, Universidad Estatal del Sur de Manab�, Jipijapa, Manab�, Ecuador.
Resumen
El s�ndrome respiratorio ocasionado por el COVID-19 es procedencia de una enfermedad infecciosa respiratoria que causa manifestaciones cl�nicas muy severas en donde ha denotado a nivel mundial casos de mortandad. Los m�todos de diagn�sticos moleculares han contribuido a la respectiva detecci�n del COVID-19 de manera positiva ante la sociedad. Determinar la utilidad cl�nica de pruebas moleculares en el diagn�stico de pacientes afectados por COVID-19. La presente investigaci�n es de dise�o documental y el tipo de estudio es descriptivos, se revis� revistas indexadas en las bases de datos cient�ficas PubMed, SciELO, SciencieDirect, Dialnet, ELSEVIER, Redalyc y Latindex. Adicional a esto se revisaron trabajos alojados en repositorios de instituciones universitarias. Los diagn�sticos moleculares tuvieron relevancia cl�nica para que el paciente sea diagnosticado y tratado de manera m�s eficiente debido a los altos porcentajes de sensibilidad y especificidad de las pruebas moleculares, las pruebas serol�gicas o de anticuerpo manifiestan los anticuerpos producidos a medida que se combate el virus y determina la infecci�n. las pruebas moleculares representan una opci�n superior para la detecci�n de la COVID-19. En conclusi�n, la capacidad de estas pruebas para revelar la presencia del virus ha sido sumamente efectiva para la detecci�n del coronavirus, en donde, va a depender de su sensibilidad y especificidad seg�n el m�todo de diagn�stico que se vaya a elegir.
Palabras clave: PCR; Pruebas moleculares; Utilidad cl�nica; COVID-19; Diagn�stico.
Abstract
The respiratory syndrome caused by COVID-19 is the origin of an infectious respiratory disease that causes very severe clinical manifestations where it has denoted cases of mortality worldwide. Molecular diagnostic methods have contributed to the respective detection of COVID-19 in a positive way for society. Determine the clinical usefulness of molecular tests in the diagnosis of patients affected by COVID-19. The present research has a documentary design and the type of study is descriptive; journals indexed in the scientific databases PubMed, SciELO, SciencieDirect, Dialnet, ELSEVIER, Redalyc and Latindex were reviewed. In addition to this, works hosted in repositories of university institutions were reviewed. Molecular diagnoses had clinical relevance so that the patient is diagnosed and treated more efficiently due to the high percentages of sensitivity and specificity of molecular tests, serological or antibody tests show the antibodies produced as the virus is fought and determines the infection. Molecular tests represent a superior option for the detection of COVID-19. In conclusion, the ability of these tests to reveal the presence of the virus has been extremely effective for the detection of the coronavirus, where it will depend on their sensitivity and specificity depending on the diagnostic method that is going to be chosen.
Keywords: PCR; Molecular tests; Clinical utility; COVID-19; Diagnosis.
Resumo
A s�ndrome respirat�ria causada pela COVID-19 � a origem de uma doen�a respirat�ria infecciosa que provoca manifesta��es cl�nicas muito graves onde tem denotado casos de mortalidade em todo o mundo. Os m�todos de diagn�stico molecular t�m contribu�do para a respetiva dete��o da COVID-19 de forma positiva para a sociedade. Determinar a utilidade cl�nica dos testes moleculares no diagn�stico de pacientes afetados pela COVID-19. A presente pesquisa tem desenho documental e o tipo de estudo � descritivo; foram revisados peri�dicos indexados nas bases de dados cient�ficas PubMed, SciELO, SciencieDirect, Dialnet, ELSEVIER, Redalyc e Latindex. Al�m disso, foram revisados trabalhos hospedados em reposit�rios de institui��es universit�rias. Os diagn�sticos moleculares tiveram relev�ncia cl�nica para que o paciente seja diagnosticado e tratado com mais efici�ncia devido aos altos percentuais de sensibilidade e especificidade dos testes moleculares, os testes sorol�gicos ou de anticorpos mostram os anticorpos produzidos � medida que o v�rus � combatido e determina a infec��o. Os testes moleculares representam uma op��o superior para a detec��o da COVID-19. Concluindo, a capacidade destes testes em revelar a presen�a do v�rus tem sido extremamente eficaz para a detec��o do coronav�rus, onde depender� da sua sensibilidade e especificidade dependendo do m�todo de diagn�stico que for escolhido.
Palavras-chave: PCR; Testes moleculares; Utilidade cl�nica; COVID 19; Diagn�stico.
Introducci�n
La enfermedad por COVID-19 es una enfermedad infecciosa muy conocido a nivel mundial como la patolog�a provocada por un nuevo coronavirus que ocasiona s�ndrome respiratorio, morfol�gicamente se visualiza de manera redonda u ovalada y en ciertas ocasiones hasta polim�rficas, su tama�o oscila entre los 60 nm hasta los 14 nm, se expande a trav�s de la neumon�a, dificultad para respirar, por sepsis o choque s�ptico, entre otros (1).
Inicialmente, la COVID-19 es un tipo de s�ndrome respiratorio que se incluyen dentro de la familia Coronaviridae, nombrada as� por la Organizaci�n Mundial de la Salud (OMS), este nuevo tipo de coronavirus que ha afectado a las personas se detect� por primera vez en la ciudad de Wuhan, en China en diciembre del a�o 2019, desencadenando as� una emergencia mundial, en las personas que presentan esta infecci�n viral se pueden alterar algunos par�metros o resultados de laboratorios y son medidos mediante pruebas de laboratorios, en donde, dicha pruebas es la Reacci�n de cadena de polimerasa, siendo uno de ellos m�todos de diagn�sticos m�s utilizados para la detecci�n del virus SARS CoV2 (2).�
Por otra parte, la b�squeda de un diagn�stico m�s espec�fico se present� como una gran problem�tica durante la pandemia, por consiguiente, se evidenci� la necesidad de implementar diferentes tipos o m�todos de diagn�sticos moleculares y validaciones comparativas de nuevas pruebas avanzadas, estas pruebas han sido herramientas clave para la detecci�n de la enfermedad (3).
En los �ltimos a�os, la seguridad sanitaria a nivel global se ha posicionado como una prioridad internacional, esto se debe a la constataci�n de que las enfermedades no reconocen l�mites en un mundo marcado por poblaciones en constante cambio y una expansi�n significativa (4). Esta enfermedad ha enfrentado una emergencia de un desconocido coronavirus que causa afecciones letales como el S�ndrome Respiratorio Agudo Severo (SARS), en donde se recomend� mucho la prueba de Reacci�n en Cadena de la Polimerasa en Tiempo Real (PCR-RT) ya que esta ten�a sus propias ventajas para el correspondiente an�lisis (5)
Ciertamente, esta crisis pand�mica gener� desorden en todos los aspectos de la sociedad, llevando a una respuesta inmediata para el diagn�stico adecuado. Se implementaron estrategias esenciales para controlar la enfermedad mediante la pronta identificaci�n del virus SARS-CoV-2. Un equipo de cient�ficos se encarg� de llevar a cabo la aplicaci�n de las pruebas moleculares, describiendo el empleo de cebadores y de las sondas para la adecuada identificaci�n de los genes E y RdRp mediante la t�cnica de RT-PCR (6).
Por lo tanto, Ecuador fue el segundo pa�s de Sur Am�rica en dar a conocer los casos confirmados por este virus, en donde su primer caso nacional demostrado fue en la capital y desde all� dio hincapi� a su r�pida propagaci�n a nivel nacional causando un gran n�mero significativo de mortandad (7)
Adem�s, los m�todos de detecci�n molecular son herramientas muy esenciales, por lo tanto, se deben utilizar de manera complementaria a la valoraci�n cl�nica, para poder interpretar cualquier prueba de detecci�n molecular se debe de conocer su utilidad cl�nica, la calidad y los valores predictivos (8). Asimismo, permitir� tener una noci�n mucho m�s clara de c�mo poder realizar la manipulaci�n de la prueba. Por otra parte, las pruebas moleculares y las pruebas de detecci�n de ant�genos ayudaron a identificar la presencia del virus, detectando ya sea su material gen�tico o las prote�nas de la membrana. Adicional a esto, existieron pruebas serol�gicas, que detectaban la respuesta inmune ante la presencia de la infecci�n viral (9).
Por ende, la identificaci�n molecular del ARN viral como m�todo de diagn�stico para el SARS-CoV-2 es innegable, gracias a su destacado rendimiento anal�tico, es necesario reconocer la eficacia de esta t�cnica por su alta sensibilidad y especificidad, conocida como retrotranscripci�n seguida de la reacci�n en cadena de polimerasa (RT-PCR). De igual manera se describe como es de gran importancia garantizar una buena etapa preanal�tica en la toma de muestra, calidad, transporte y almacenamiento de la misma optimizando el resultado (10).
Por consiguiente, los hisopados nasofar�ngeos y orofar�ngeos han sido muestras regularmente utilizadas para detectar la apariencia del virus SARS-CoV2 mediante la prueba de Reacci�n de cadena de polimerasa en tiempo real. Sin embargo, esta afecci�n tambi�n se ha descubierto en otros fluidos biol�gicos a trav�s de las cuales se ha logrado alcanzar diferentes eficacias de detecci�n del virus (11). Cabe mencionar, que una baja eficiencia de extracci�n de muestra biol�gica puede dar se�ales muy bajas durante la amplificaci�n exponencial dando como resultados de posibles falso negativos (10).
Finalmente, el objetivo de este estudio es explicar la importancia que tiene el diagn�stico molecular para COVID-19, ofreciendo una v�a m�s precisa, espec�fica y r�pida para identificar la enfermedad. Dado que, estas t�cnicas se llevan a cabo con mayor frecuencia en varios laboratorios de referencias, en cuanto a su aplicaci�n asegura una terapia de tratamiento m�s espec�fica y evita la administraci�n de medicamentos emp�ricos que podr�an ser inapropiados para la enfermedad (12).
Claro est�, que los prop�sitos de este estudio se centrar�n en evaluar la utilidad de la reacci�n en cadena de la polimerasa en tiempo real al diagn�stico de pacientes afectados por COVID-19, tambi�n se puntualizar�n las principales ventajas de utilizar la prueba de reacci�n en cadena de la polimerasa, as� como sus limitaciones en entorno a los laboratorios cl�nicos, por �ltimo, se detallar� los distintos m�todos de diagn�stico que se han utilizado a lo largo del curso de la pandemia.
Materiales y m�todos
La presente investigaci�n es de dise�o documental y el tipo de estudio es descriptivo, se consider� revisar diferentes literaturas cient�ficas con la finalidad de argumentar sobre la utilidad cl�nica de reacci�n cadena de polimerasa en tiempo real al diagn�stico de pacientes afectados por COVID-19. Se accedi� a realizar un estudio desde el primer nivel de conocimiento cient�fico para tratar la problem�tica acerca del tema. Se obtuvieron datos en revistas indexadas acogidas en las diferentes bases de datos cient�ficas como: PubMed, SciELO, SciencieDirect, Dialnet, ELSEVIER, Redalyc y Latindex. Adicional a esto se revisaron trabajos alojados en los repositorios de diferentes instituciones universitarias. Los t�rminos meSH que se utilizaron en este trabajo fueron: pruebas moleculares, PCR, utilidad cl�nica, COVID-19 y diagn�stico.
Para la selecci�n de esta indagaci�n se opt� por incluir solo investigaciones realizadas en los �ltimos cinco a�os, se incluyeron art�culos originales, art�culos de revisi�n sistem�ticas y trabajos de posgrados en los diferentes idiomas. Al realizar la indagaci�n de los art�culos referente a la tem�tica expuesta, se efectu� una acentuada interpretaci�n de cada uno, seleccionando a todos aquellos que facilitaron y aportaron informaci�n relevante y precisa para la ejecuci�n de la indagaci�n. Se excluyeron los art�culos de presentaci�n de casos cl�nicos, las gu�as cl�nicas, las publicaciones de congresos, las memorias de eventos, cartas al editor y art�culos no relacionados al tema.
Esta investigaci�n cumple con los acuerdos y principios de �tica de la investigaci�n y el manejo de informaci�n confidencial, tanto nacional como internacional, respetando los derechos de los autores y resguardando su propiedad intelectual, de esta manera realizando una adecuada aplicaci�n de las referencias y de la informaci�n obtenida de acuerdo a las normas Vancouver evitando el menor porcentaje de plagio (13).
Resultados�
Tabla 1: Aporte de reacci�n cadena de polimerasa al diagn�stico de pacientes afectados por COVID-19.
Autores y referencia |
A�o |
Pa�s |
Resultados |
Diaz y col.(14) |
2021 |
M�xico |
Los resultados se consiguen en algunas horas y tiene bastante especificidad para poder diferenciar el virus de la COVID-19 de otro virus con s�ntoma similares.� |
Corman y col, (15) |
2020 |
Holanda |
Tiene mayor positividad en los resultados durante los primeros d�as de inicio de los s�ntomas y su reducci�n de positividad se basa conforme transcurre la enfermedad. |
Urgiles J y Ortiz J. (16) |
2020 |
Ecuador |
Las pruebas moleculares pueden ser usadas en varios espec�menes biol�gicos seg�n sea el m�s adecuado.� |
Oliva Jos�. (17) |
2022 |
Per� |
La sensibilidad anal�tica se ve influida por la baja carga viral en pacientes que son asintom�ticos o sintom�ticos. |
Rojas y col. (18) |
2021 |
Per� |
La RT-qPCR d�plex para la detecci�n de SARS-CoV-2 dio resultados de sensibilidad y especificidad al 100% al igual que los VPP y VPN, en donde estas pruebas fueron diferenciadas por secuenciaci�n del genoma completo. |
Escalante y col. (19) |
2021 |
Per� |
Las pruebas RT-LAMP demostr� un rendimiento acorde con el diagn�stico y concordancia respecto a la RT-qPCR |
Melian y col.(20) |
2020 |
Chile |
RT-PCR a pesar de que es una prueba diagn�stica efectiva, no siempre alcanza un diagn�stico certero, ya que son varios los factores que afectan los resultados. |
Meza y col. (21) |
2020 |
Ecuador |
Los genes diana m�s utilizados en RT-PCR para la detecci�n de SARS-CoV-2 son el gen E, el gen RdRp, para estudios de conformaci�n y el gen N para estudio adicional de conformaci�n. |
An�lisis�
De acuerdo a las investigaciones realizadas en el diagnostico COVID-19 desde el 2020 hasta el 2021, se hace menci�n que los diagn�sticos moleculares si tuvieron relevancia cl�nica importante para que el paciente sea diagnosticado y tratado de manera m�s eficiente elevando las probabilidades de vida del paciente; todo esto gracias a que las pruebas moleculares cuentan con un alto porcentaje de sensibilidad y especificidad en donde la amplificaci�n de �cido nucleico tiene m�s probabilidad de detectar el virus.
Tabla 2: principales ventajas y limitaciones que tiene la prueba de reacci�n en cadena de la polimerasa en el diagn�stico de COVID-19.
Autores y referencias |
A�o |
Pa�s |
Ventajas |
Limitaciones |
Mu�oz G y Guti�rrez K. (22) |
2020 |
Portugal |
M�todo de diagn�stico est�ndar de oro para el diagn�stico de COVID-19 debido a su alta sensibilidad y especificidad. |
Recoger la muestra con la t�cnica adecuada ya que hay probabilidad de tener resultados falsos negativos o cuando se haya hecho muy temprano o muy tarde en el recorrido de la infecci�n. |
Urgiles J y Ortiz J. (23) |
2021 |
Ecuador |
Ayuda a detectar el virus tras la aparici�n de la enfermedad y entre pacientes con s�ntomas desde leves a graves |
Podr�a verse afectado los ensayos por mutaciones que se pueden generar en los genes diana de detecci�n. |
Sandoval y col. (24) |
2023 |
Ecuador |
La RT-PCR en tiempo real (RT-qPCR) utiliza un marcador fluorescente que permite monitorizar la amplificaci�n del material gen�tico viral en tiempo real |
No alargar el tiempo de procesamiento, para que no haya alteraci�n en los resultados. |
Brandsma y col. (25) |
2021 |
Holanda |
Detecta la presencia del virus desde el instante de la infecci�n. |
Debe de haber suficiente carga viral para que la prueba lo detecte |
An�lisis
En el contexto de ventajas de un diagn�stico molecular, las cuales se usan para detectar el material gen�tico del virus en el organismo, confirmando o descartando la enfermedad conociendo si hay o no una infecci�n activa, tanto en pacientes que presente s�ntomas leves, as� como en pacientes con s�ntomas graves. Luego tenemos peque�as limitaciones como la necesidad de realizar una buena toma de muestra para descartar un falso negativo que se puede presentar al momento de leer la prueba y as� evitar errores de lecturas, adicional a estos no se debe alargar el tiempo de procesamiento de la muestra para evitar alteraciones en los resultado, el tiempo de infecci�n del paciente es crucial ya que debe tener la m�nima carga viral del virus en su organismo para confirma positividad de la prueba y en un porcentaje menor la mutaci�n del virus ya que la prueba es espec�fica para su diagn�stico.
Tabla 3: Diferencias entre los distintos tipos de diagn�stico para la detecci�n de COVID-19.
Autores y referencias |
A�o |
Pa�s |
Tipo de pruebas |
Diferencias |
Rauch y col. (26) |
2021 |
EE. UU |
RT-qPCR |
Optimo en porcentaje de inhibici�n, tiempo de corrida, sensibilidad y facilidad en la interpretaci�n. |
Vidal y col. (27) |
2020 |
Per� |
Prueba serol�gica |
La lectura tiene una duraci�n de 10 minutos, de la cual se observa una banda (control) que indica que la prueba est� bien realizada, adicional a esto se realiza mediante la obtenci�n de sangre capilar por digito-punci�n. |
Soto y col. (28) |
2021 |
Espa�a |
Pruebas de ant�genos (r�pidas) |
Se presentan como alternativas bastantes econ�micas, r�pidas y que no requieren de equipamiento ni personal cualificado, su muestra es nasofar�ngea. |
Cortes y col.� (29) |
2021 |
Espa�a |
Pruebas de ant�genos (r�pidas) |
Alta especificidad, pero con una sensibilidad algo menor a diferencia de otros estudios. |
Pannelli y col. (30) |
2020 |
Argentina |
Pruebas de anticuerpos (r�pidas) |
Permiten reconocer los resultados de 10 a 15 minutos si una persona presenta los anticuerpos o no, detecta lo mismo que las pruebas serol�gicas, pero con menos sensibilidad. Su muestra es solo capilar |
An�lisis
Dado los resultados, los autores mencionaron que sin duda alguna las pruebas moleculares tienen mejores ventajas para la detecci�n de COVID-19, debido a su capacidad de revelar el virus causante de la enfermedad confirm�ndolo; en las pruebas de ant�genos, son importantes en la fase inicial de la enfermedad, pero con cierto porcentaje de falsos positivos o negativos. Cabe mencionar que las pruebas serol�gicas o de anticuerpo seg�n los datos obtenidos estas detectan los anticuerpos producidos a medida que se combate el virus y determina si alguien ha sido infectado.�
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Discusi�n
En el diagn�stico de la utilidad cl�nica de la reacci�n en cadena de la polimerasa se precis� y existe una eficiente detecci�n del SARS-CoV-2 ha sido esencial para controlar la propagaci�n de la COVID-19. Diversos estudios realizados en distintos pa�ses han analizado varios enfoques de diagn�stico molecular, aportando datos valiosos sobre su sensibilidad, especificidad y rendimiento en diferentes condiciones cl�nicas.
Dentro de los hallazgos m�s relevantes en esta revisi�n tenemos el resalte de los Resultados R�pidos y Especificidad en M�xico (D�az et al., 2021), en donde enfatiza la prontitud en la entrega de resultados, un aspecto esencial para la toma inmediata de decisiones en el abordaje de la enfermedad.
En el estudio de (Corman et al., 2020), que hace �nfasis sobre la positividad a lo largo de la enfermedad en Holanda, siendo los primeros d�as de los s�ntomas abarcada con una reducci�n gradual conforme progresa la enfermedad, habiendo este patr�n temporal de positividad el desencadenante de repercusiones significativas en la determinaci�n del momento m�s adecuado para llevar a cabo pruebas diagn�sticas.
La diversidad en la aplicaci�n de pruebas moleculares en Ecuador, destacada por Urgiles y Ortiz en 2020, resaltaron la flexibilidad de estas pruebas al demostrar su viabilidad en distintos espec�menes biol�gicos. Esta versatilidad puede ser pr�ctica en la recopilaci�n de muestras y en la eficiente utilizaci�n de recursos, mientras que la observaci�n destacada por Oliva (2022) acerca de la influencia de la baja carga viral en la sensibilidad anal�tica de las pruebas moleculares, tanto en pacientes asintom�ticos como sintom�ticos, plantea cuestiones cruciales en la interpretaci�n de los resultados. Este aspecto cobra especial relevancia al considerar la poblaci�n asintom�tica, donde la carga viral puede ser significativamente menor.
La alta precisi�n demostrada por el RT-qPCR d�plex sugiere que esta herramienta podr�a desempe�ar un papel importante en la detecci�n precisa del virus. Este nivel de exactitud es esencial, especialmente en situaciones cl�nicas y de salud p�blica donde la certeza en el diagn�stico es fundamental para la toma de decisiones, siendo demostrado por los resultados destacados por Rojas et al. (2021) en relaci�n con la sensibilidad y especificidad del RT-qPCR d�plex son notables y plantean importantes consideraciones para la mejora continua de las herramientas de diagn�stico para el SARS-CoV-2. La obtenci�n de una sensibilidad y especificidad del 100%, respaldada adem�s por la validaci�n mediante secuenciaci�n del genoma completo, subraya la confiabilidad excepcional de esta t�cnica en particular manifestada por una evidencia presentada por Escalante et al. (2021) sobre el rendimiento de las pruebas RT-LAMP ofrece una perspectiva intrigante en el �mbito del diagn�stico del SARS-CoV-2. El hecho de que estas pruebas exhiban un rendimiento en concordancia con la RT-qPCR, una t�cnica considerada est�ndar, sugiere una validez y utilidad sustanciales de la RT-LAMP.
La posibilidad de considerar la prueba RT-LAMP como una alternativa viable es particularmente relevante, ya que podr�a abordar preocupaciones clave en la gesti�n de la COVID-19. La mencionada metodolog�a m�s r�pida y menos costosa podr�a tener un impacto significativo, especialmente en entornos donde la necesidad de resultados r�pidos y la optimizaci�n de recursos son imperativas.
De la misma forma la identificaci�n de los genes diana, como el gen E, RdRp y N, por Meza et al. (2020), en el contexto de las pruebas de RT-PCR, plantea consideraciones clave para el desarrollo y la estandarizaci�n de protocolos en la detecci�n del SARS-CoV-2. Esta informaci�n proporciona una base fundamental para optimizar la sensibilidad de las pruebas moleculares, lo que tiene importantes implicaciones para la precisi�n y la confiabilidad del diagn�stico.
Al realizar la elecci�n de genes diana se debe ser muy espec�ficos, ya que afecta directamente la sensibilidad y especificidad de la prueba. La inclusi�n de genes como E, RdRp y N, que son fundamentales en la estructura y replicaci�n del virus, podr�a contribuir a una detecci�n m�s precisa y robusta del SARS-CoV-2. Este enfoque no solo aumenta la sensibilidad, sino que tambi�n puede mejorar la capacidad de distinguir el virus de otras cepas virales o fragmentos gen�ticos similares.
Incluir una estandarizaci�n de los protocolos es crucial para garantizar la coherencia y la comparabilidad de los resultados entre diferentes laboratorios y ubicaciones geogr�ficas. La informaci�n proporcionada por Meza et al. podr�a ser esencial en este sentido, ya que destaca los genes espec�ficos que est�n siendo ampliamente utilizados, brindando una base para la uniformidad en los procedimientos de diagn�stico.
Sin embargo, es importante considerar que la evoluci�n del virus podr�a influir en la efectividad de los genes diana seleccionados con el tiempo. La vigilancia continua y la adaptabilidad de los protocolos son esenciales para mantener la eficacia de las pruebas moleculares en el contexto de la din�mica viral.
La diversidad de enfoques de diagn�stico molecular evidenciada en los estudios presenta un panorama integral para abordar los desaf�os de la COVID-19. La importancia de resultados r�pidos, la temporalidad de la positividad y la flexibilidad en la aplicaci�n de pruebas moleculares subrayan la necesidad de adaptabilidad en las estrategias de diagn�stico.
El papel destacado del RT-qPCR d�plex como una herramienta de alta precisi�n destaca su importancia en situaciones cl�nicas cruciales, pero tambi�n plantea preguntas sobre su accesibilidad y aplicabilidad a una gran escala. La viabilidad de la prueba RT-LAMP como alternativa m�s r�pida y econ�mica sugiere una perspectiva alentadora, especialmente en entornos con restricciones de recursos.
La influencia de la baja carga viral en la sensibilidad anal�tica, especialmente en los pacientes que son asintom�ticos, recalca la complejidad en la interpretaci�n de los resultados. Esta observaci�n resalta la necesidad de considerar cuidadosamente el contexto cl�nico al momento de interpretar los resultados de las pruebas moleculares.
En Ecuador, se enfatiza la diversidad en la aplicaci�n de las pruebas moleculares, subrayando la flexibilidad y la viabilidad en los distintos espec�menes biol�gicos. Al mismo tiempo, se resalta la influencia de la baja carga viral en la sensibilidad anal�tica, especialmente en los pacientes asintom�ticos, planteando los desaf�os en la interpretaci�n de los resultados.
Adem�s, la discusi�n podr�a extenderse a la aplicabilidad pr�ctica de esta informaci�n en entornos cl�nicos y de salud p�blica. �C�mo puede esta identificaci�n de genes diana contribuir a la mejora de las pruebas en diferentes contextos y poblaciones? �Existen consideraciones espec�ficas para la aplicaci�n de estos protocolos en �reas con diferentes tasas de infecci�n o con variantes emergentes?
Podemos decir que, aunque la RT-LAMP presenta prometedores resultados de rendimiento y se sugiere como una alternativa pr�cticamente viable, es necesario abordar cuestiones adicionales y as� poder comprender completamente su aplicabilidad y efectividad en diversos escenarios cl�nicos y de salud p�blica. La evaluaci�n continua de esta tecnolog�a y su integraci�n en las pr�cticas de diagn�stico contribuir�n a fortalecer la respuesta global a la pandemia, en esta discusi�n se refleja la complejidad y la din�mica en curso en el campo del diagn�stico del SARS-CoV-2, destacando la importancia de la innovaci�n, la adaptabilidad y la colaboraci�n global para abordar los desaf�os cambiantes de la pandemia.
Conclusiones
La evoluci�n del virus y la complejidad en la interpretaci�n de los resultados ante la pandemia que se vivi� de COVID-19 ha generado diversos desaf�os y una gran necesidad de adaptabilidad, por la presencia de pacientes que son asintom�ticos, teniendo que promoverse una vigilancia continua y adaptabilidad en los protocolos de diagn�stico.
Mediante los resultados destacados sobre la sensibilidad y especificidad del RT-qPCR d�plex sugieren un papel crucial en la detecci�n precisa del virus, respaldado por una confiabilidad excepcional validada mediante secuenciaci�n del genoma completo, al igual que, con las pruebas de detecci�n r�pida de ant�genos tambi�n son �tiles en el diagn�stico de la infecci�n aguda por SARS CoV2, asimismo las pruebas serol�gicas tambi�n identifican la exposici�n previa al virus, es por eso que estos m�todos son de gran relevancia cl�nica para la identificaci�n del virus.
Finalmente, en virtud de los resultados obtenidos los autores concluyen de manera muy contundente en donde la prueba de reacci�n en cadena de la polimerasa representa una opci�n superior para la debida detecci�n de la COVID-19. La raz�n principal de esta afirmaci�n radica b�sicamente en la extraordinaria capacidad que tiene esta prueba para poder manifestar o detectar la presencia del virus causante de la enfermedad respiratoria. En contraste, se destaca la limitaci�n de las pruebas de ant�genos, ya que en el momento de la detecci�n pueden no evidenciar por completo la presencia del virus debido a la posible carencia del mismo en la muestra.
Referencias
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