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El uso del �loe vera y la glucosa como elementos protectores para la conservaci�n del semen porcino

 

The use of aloe vera and glucose as protective elements for the conservation of boar semen

 

O uso de aloe vera e glicose como elementos protetores para a conserva��o do s�men su�no

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Correspondencia: macarreno@espam.edu.ec

 

 

Ciencias T�cnicas y Aplicadas ���

Art�culo de Investigaci�n

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* Recibido: 23 de septiembre de 2022 *Aceptado: 12 de octubre de 2022 * Publicado: 29 de noviembre de 2022

 

1. Mag�ster en Medicina Veterinaria menci�n en salud y reproducci�n de especies productivas, Docente Tiempo Completo en la Escuela Superior Polit�cnica Agropecuaria de Manab� ESPAM, Manab�, Ecuador.
2. Mag�ster en Producci�n Animal, Docente investigador en la Escuela de Medicina Veterinaria en la Facultad de Ciencias Veterinarias de la Universidad T�cnica de Manab�, Manab�, Ecuador.
3. Mag�ster en Auditor�a Integral, Docente de la Facultad de Ciencias Administrativas y Econ�micas de la Universidad T�cnica de Manab�, Manab�, Ecuador.

Resumen

La presente investigaci�n tuvo como fin la aplicaci�n de varios tratamientos para la evaluaci�n de la supervivencia de los espermatozoides y el objeto de estudio en las diferentes temperaturas someti�ndose a procesos de adaptaci�n previo a la conservaci�n, utilizando el aloe vera y combinaci�n con glucosa en distintas concentraciones. Por consiguiente, el objetivo fue evaluar el impacto que provoca la aplicaci�n de aloe vera y glucosa en la conservaci�n del semen porcino. En tal sentido, se emple� un dise�o de investigaci�n experimental, de tipo documental y de campo para comprender la importancia que tiene tanto aloe vera y glucosa como protectores para conservaci�n esperm�tica del semen porcino. Entre los principales resultados destacan que el proceso de congelaci�n tuvo una supervivencia no acta para la fecundaci�n. En conclusi�n, el Aloe vera en un 20% no produjo diferencia significativa en los par�metros de motilidad, viabilidad y anormalidad en comparaci�n con el diluyente comercial en el caso de las observaciones en fresco y refrigerado.

Palabras Clave: Verraco; concentraci�n; espermatozoides; inseminaci�n.

 

Abstract

The purpose of this investigation was the application of several treatments for the evaluation of the survival of spermatozoa and the object of study at different temperatures, undergoing adaptation processes prior to conservation, using aloe vera and combination with glucose in different concentrations. . Therefore, the objective was to evaluate the impact caused by the application of aloe vera and glucose in the conservation of boar semen. In this sense, an experimental, documentary and field research design was used to understand the importance of both aloe vera and glucose as protectors for sperm conservation of porcine semen. Among the main results, it stands out that the freezing process had a survival that did not record for fertilization. In conclusion, Aloe vera did not produce a significant difference in 20% of the motility, viability and abnormality parameters compared to the commercial diluent in the case of fresh and refrigerated observations.

Keywords: Boar; concentration; sperm; insemination.

 

 

 

Resumo

O objetivo desta investiga��o foi a aplica��o de v�rios tratamentos para a avalia��o da sobreviv�ncia dos espermatozoides e objeto de estudo em diferentes temperaturas, passando por processos de adapta��o anteriores � conserva��o, usando aloe vera e combina��o com glicose em diferentes concentra��es. Portanto, o objetivo foi avaliar o impacto causado pela aplica��o de aloe vera e glicose na conserva��o do s�men su�no. Nesse sentido, um projeto de pesquisa experimental, documental e de campo foi usado para entender a import�ncia do aloe vera e da glicose como protetores para a conserva��o esperm�tica do s�men su�no. Dentre os principais resultados, destaca-se que o processo de congelamento teve uma sobrevida que n�o registrou para fecunda��o. Em conclus�o, o Aloe vera n�o produziu diferen�a significativa em 20% dos par�metros de motilidade, viabilidade e anormalidade em compara��o com o diluente comercial no caso de observa��es frescas e refrigeradas.

Palavras-chave: Javali; concentra��o; esperma; insemina��o.

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Introducci�n

La inseminaci�n artificial porcina tiene una gran aceptaci�n de los productores a nivel nacional e internacional por su eficiencia o el alto rendimiento, es una t�cnica ampliamente extendida en el sector porcino teniendo mejoras en las metodolog�as que se pueden utilizar para obtener rendimientos mucho mejores en los resultados de fertilidad que se necesita para el rendimiento en la producci�n (Garc�a et al, 2010). En las explotaciones porcinas el primer problema que se enfrenta es la selecci�n de los verracos que ser�n los donantes de semen, los cuales deben ser escogidos sobre la base de factores gen�ticos, sanitarios y reproductivos (Razas porcinas 2018).

Los diluyentes tradicionales del semen porcino aseguran una supervivencia de su capacidad fecundante y porcentaje de movilidad esperm�tica en fresco y refrigeraci�n hasta siete d�as, una alternativa para preservar el semen en los actuales tiempos es la crioconservaci�n que para esta especie en espec�fico resulta dif�cil esta aplicaci�n por su baja supervivencia post-congelado.

La criopreservaci�n de semen es una biotecnolog�a importante para el mantenimiento y la diversidad gen�tica de muchas especies animales. A pesar de los avances alcanzados se evidencia la necesidad de nuevos estudios vislumbrando el uso de otras sustancias que pueden ofrecer mayor protecci�n a la c�lula esperm�tica (Souza et al., 2014).

La t�cnica de criopreservaci�n permite conservar los espermatozoides por tiempo indefinido sin que pierdan su capacidad fecundante, ofrece algunas posibilidades inalcanzables para las otras t�cnicas m�s tradicionales de conservaci�n, como es la refrigeraci�n. Entre las ventajas a considerar de la criopreservaci�n sobre la refrigeraci�n, como procedimiento para conservar semen de porcino, podemos realizar la importaci�n/exportaci�n de dosis seminales

Si bien la congelaci�n de semen no es una t�cnica nueva, recientes investigaciones han logrado avances en la congelaci�n de semen.� El inter�s por mejorar dicha tecnolog�a se debe al riesgo de desabastecimiento que supondr�a una eventual epidemia, y seria vital importar y exportar semen de verracos de alta calidad gen�tica (Echegaray 2001).

El procesamiento y preservaci�n de semen permite el mejoramiento gen�tico a largo plazo, por lo cual el semen congelado siempre tendr� una labor que cumplir en la especie porcina, en la producci�n de pureza de bisabuelas y abuelas para reposici�n en las granjas de selecci�n, uso que se le ha venido dando tradicionalmente y que podr� ser realizada exclusivamente con semen congelado a futuro.

El estr�s que el proceso de congelaci�n causa a la estructura de la c�lula est� relacionado con la circulaci�n del agua a trav�s de la membrana y la deshidrataci�n, as� como la posibilidad de que se forme hielo intracelular si el enfriamiento es r�pido (Gonz�lez, 2010).

Se han realizado diferentes intentos para contrarrestar los efectos detrimentales generados por los protocolos de criopreservaci�n, entre los cuales destacan la b�squeda de marcadores de congelabilidad, la selecci�n y preparaci�n de espermatozoides y la suplementaci�n de los medios de congelaci�n y descongelaci�n con plasma seminal, antioxidantes y otros aditivos (Yeste, 2015).

En la Provincia de Manab� se viene dando mejoras constantes en la industria porcina, sin embargo, la aplicaci�n de biotecnolog�as no es de uso frecuente dado al desconocimiento o a la inseguridad que se ha generado en los porcinocultores, siendo esta la principal herramienta del avance gen�tico de las piaras y de la mejora de los �ndices reproductivos, as� como el crecimiento de los planteles porcinos como industria.

1. DESARROLLO

1.1.          Historia en la inseminaci�n artificial porcina

La inseminaci�n artificial porcina (IA) esta se inici� en los primeros a�os del siglo veinte, por (Ivanow, 1907 y 1922). Posteriormente, se desarroll� su uso en la d�cada de los treinta en las granjas estatales rusas (Rodin y Lipatov, 1935; Milovanow, 1938) y en los a�os siguientes se fue extendiendo a otros pa�ses (en USA Mckenzie, 1931; en Jap�n, Ito et al., 1948). La t�cnica fue reintroducida en el sector porcino en el Reino Unido gracias a los trabajos desarrollados por Chris Polge (1970), ya que esta es una ventaja que aporta a esta tecnolog�a, el aprovechamiento del potencial gen�tico de los mejores verracos en un amplio n�mero de cerdas reproductoras, facilitando la mejora gen�tica.

1.2.          Raza de cerdos Pietrain

1.2.1.     Prototipo racial

Podemos encontrar los est�ndares aceptados para la raza Pietrain en los siguientes puntos:

• Cabeza: relativamente ligera, corta, recta c�ncava y carrillo poco desarrollado.
• Orejas: peque�as dirigidas horizontalmente hacia delante y con la punta ligeramente encorvada hacia arriba.
• Cuello: corto, con cargado arm�nico en sus uniones con cabeza y tronco y escasa papada.
• Espaldas: Prominentes, muy musculadas y adheridas al tronco. 
• Dorso: Bastante largo, ligeramente abombado, ancho con una ligera depresi�n longitudinal delimitada por dos grandes masas musculares. 
• Lomo: Muy musculoso ancho y grueso. 
• T�rax: Ancho, cil�ndrico y de profundidad media, musculado con costillas fuertemente arqueadas. 
• Abdomen: Poco desarrollado y bien sostenido, con l�nea inferior paralela al dorso, y un m�nimo de doce mamas normales colocadas regularmente.
• Nalgas y muslos: Muy anchos, llenos y redondeados descendiendo hasta el corvej�n. 
• Cola: Inserci�n baja. 
• Pelaje: blanco sucio, esparcido con manchas irregulares. Provisto de pelos duros y cortos, y frecuentemente con un reflejo rojizo caracter�stico alrededor de las manchas negras. (Razas porcinas 2018)

 

1.2.2.     Caracter�sticas generales y aptitudes de la raza Pietrain

Raza seleccionada, sobre todo por la calidad de su canal, junto con Hampshire y Landrace. Donde esta raza es la que peores par�metros de crecimiento (velocidad de crecimiento baja), �ndices de conversi�n (necesidad de elevado nivel de alimentaci�n para incrementar el peso vivo) y reproducci�n (n�mero de lechones por cerda y a�o) da, sin embargo, posee el mayor porcentaje de piezas nobles y posee mucha grasa intramuscular. Tambi�n es la raza que presenta en mayores ocasiones PSE (carnes p�lidas, blandas y exudativas)

La conformaci�n excepcional del cerdo de raza Pietrain lo convierte en el m�s indicado para cruces, cuyos productos ofrecen una canal muy mejorada, independientemente del tipo de madre.

1.2.3.     Aparato Genital del Cerdo

Se van a recordar esquem�ticamente los �rganos que componen el aparato genital del verraco, su regulaci�n neuroendocrina y la producci�n esperm�tica, ya que la pr�ctica habitual de la extracci�n de semen e IA a nivel de granja hace necesaria una buena familiarizaci�n con estos aspectos en esta especie.���

El sistema reproductor masculino est� constituido de:

a)     Gl�ndulas sexuales: test�culos.

b)     Conductos secretorios: conducto eferente, deferente y epid�dimo.

c)     Gl�ndulas sexuales accesorias: ves�cula seminal, pr�stata, gl�ndulas bulbouretrales o de cowper, gl�ndulas uretrales o de little.

d)     �rgano copulador: pene

e)     Prepucio

f)      Uretra (Sa�z. et., al., 2004).

 

1.2.3.1.          Estructura interna

Los conductos eferentes tienen un epitelio cil�ndrico simple con c�lulas ciliadas y c�lulas con micro vellosidades. Este �ltimo tipo contiene adem�s gr�nulos de secreci�n. La capa muscular de fibra lisa es delgada. Tanto los cilios como las fibras musculares facilitan la progresi�n de los espermatozoides hacia el conducto epididimario Este se caracteriza por poseer un epitelio de tipo seudo estratificado, con vellosidades y una capa muscular fina. El conducto deferente mantiene la morfolog�a epitelial del conducto epididimario, pero su capa muscular es mucho m�s gruesa y est� formada por tres l�minas de fibras: una interna (longitudinal) otra media (circular) y una l�mina externa donde las fibras musculares vuelven a adoptar una disposici�n longitudinal. Rodeando a la capa muscular existe una adventicia de tejido conectivo denso. La estructura de la ampolla es la misma que la del resto del conducto deferente.

1.2.3.2.          Formaci�n esperm�tica

La espermatog�nesis es un proceso largo y dirigido en el que las c�lulas madres diploides, ubicadas dentro de los t�bulos semin�feros (espermatogonias), se dividen por mitosis para mantener su n�mero y que, de forma c�clica, generan progenie que sufren progresivas divisiones mei�ticas hasta diferenciarse en esperm�ticas haploides, que se liberan como espermatozoides (producci�n del semen de cerdos). La espermatog�nesis, en el verraco, lleva alrededor de 35-40 d�as, y la maduraci�n y transporte desde el test�culo al epid�dimo, alrededor de 16 d�as.� La totalidad del proceso lleva alrededor de 50-55 d�as.

 

Metodolog�a

En el desarrollo de la presente investigaci�n se emple� un dise�o experimental, en raz�n de que se procedi� a estudiar la vitalidad en diferentes temperaturas del semen porcino y la supervivencia de este a la congelaci�n.

El tipo de investigaci�n empleado fue de campo en raz�n de que se realizaron visitar en el lugar donde ocurren los hechos o fen�menos objeto de estudio, adem�s, de realizar una revisi�n documental la cual es definida por Bernal (2010) como: �un an�lisis de la informaci�n escrita sobre un determinado tema, con el prop�sito de establecer relaciones, diferencias, etapas, posturas o estado actual del conocimiento respecto al tema objeto de estudio� (p.111).

La poblaci�n estuvo conformada por las fincas ubicadas en el sitio El Tillo de la Parroquia Calder�n del Cant�n Portoviejo en la finca del mismo nombre, la cual se encuentra ubicada en las siguientes coordenadas latitud 1�1 '11.23� S longitud 80�21'52.70� O, y a una altitud de 44 Msnm. Para el presente trabajo se utiliz� un cerdo de raza Pietrain al cual se le extrajo dos muestras de semen para el estudio.

Con respecto a la muestra se utiliz� un verraco de raza Pietrain con una edad de 2 a�os, una altura de 1,04 m y un peso de 195 Kg, como fuente de las c�lulas germinales(semen), al cual se le realiz� un examen f�sico y evaluaci�n de su capacidad reproductiva observando las condiciones de este.

Respecto al m�todo de recolecci�n manual utilizado fue a trav�s de la t�cnica de doble mano enguantada descripta por C�rdova Izquierdo (2015). Se recolecto dos eyaculados para obtener volumen y concentraci�n esperm�tica adecuada, la misma que fue homogenizada y dividida en 24 dosis las cuales conten�an 20x103 espermatozoides por dosis.

El proceso de colecta fue realizado a las 6 am en el �rea destinada para el efecto, la cual previamente fue sanitizada. Dentro de los materiales utilizados se encontraba un maniqu� de colecta, un vaso colector, una funda con filtro de marca y guantes de l�tex.� Minutos antes de realizar la colecta se realiz� la limpieza del prepucio con desinfectante y se estimul� para la subida al maniqu�. Se colect� las dos �ltimas porciones del eyaculado en un vaso colector armado con la funda de filtro, con intervalo de 10 minutos entre eyaculaci�n, para posteriormente ser llevado al laboratorio ubicado dentro de la granja para su procesamiento

Dentro del laboratorio se procedi� a retirar el filtro separando las porciones seminales, se calcul� la concentraci�n utilizando el espermiodensimetro karras de marca minitube.

La morfolog�a esperm�tica se observ� con un microscopio dentro del laboratorio observando la morfolog�a, movilidad y motilidad.

La vitalidad se evalu� colocando una gota de semen con una gota de nigrosina, la cual permite te�ir a los espermatozoides muertos y facilitar su conteo y la observaci�n de la normalidad en los espermatozoides vivos.

La movilidad masal se realiz� mediante la colocaci�n de 0.5 ml de la muestra sobre un portaobjeto a 37�1�C y observada en el microscopio, evalu�ndolas seg�n los siguientes grados:

0 = No hay motilidad alguna.

1 = Hay algunos espermatozoides que se mueven, pero la imagen es de quietud.

2 = Hay espermatozoides m�viles. La imagen es de un lento flujo. No hay ondas.

����������� 3 = Hay formaci�n de ondas, pero sin conformaci�n n�tida.

����������� 4 = Las ondas se forman y desaparecen claramente.

5 = La velocidad de formaci�n y desaparici�n de las ondas es tan r�pida que el observador no puede caracterizarlas.

La movilidad individual se realiz� con la colocaci�n de dos gotas de semen para determinar sus movimientos de forma progresiva sobre cubreobjetos templado a 37�C cubiertas con portaobjetos evaluando la muestra en forma porcentual 50, 70, 80% de los siguientes par�metros:

A.    Movimiento

1.     Rectil�neo progresivo

2.     Circular y en el lugar

3.     Falta de motilidad

B.    Intensidad del movimiento

1.     + baja

2.     ++ mediana

3.     +++ alta

Para la movilidad se defini� las olas seminales en masa de 0 al 100% y de igual manera para la movilidad individual, evaluada el semen se procedi� a la diluci�n con el diluyente Vitasem en relaci�n 1:1 para el testigo, para el experimental se a�adi� el 20% de aloe vera a la diluci�n.

Se us� semen para la congelaci�n con una motilidad rectil�nea progresiva no inferior a 70%.

Preparaci�n de los diluyentes para los tratamientos

Para este proceso se utilizaron diferentes plantas de s�bila y se tomaron 20 hojas para la extracci�n de �loe vera a utilizar en la investigaci�n, est� se consider� en estado de madures mayor a 3 a�os, las hojas de s�bila utilizadas fueron recolectadas en mismo d�a de recolecci�n del semen. Las hojas fueron previamente lavadas y desinfectadas con abundante agua y alcohol a 72� GL, posterior a ello fue removida la corteza exterior para obtener la pulpa (gel) la cual se filtr� con 3 capas de gasas est�riles previa homogenizaci�n por medio de la ayuda de una licuadora dom�stica, obteniendo la cantidad suficiente para a�adir el 17% y 20%, del volumen de la diluci�n en los tratamientos.

Testigo

Estuvo integrado por un diluyente comercial (VITASEM) que conten�a los siguientes elementos: Glucosa, bicarbonato s�dico, estabilizadores de membrana y excipientes.

Tratamiento 1 Aloe 17% + glucosa 3%

Para el tratamiento �loe vera m�s la glucosa aplicada en nuestro estudio de investigaci�n se utiliz� entre el 17% y 3% respectivamente en la diluci�n madre o de origen, realizada con el diluyente comercial VITASEM (De la casa Comercial Magapor) con un volumen de 100 cm3 y con un sobre de 40 gr., donde posteriormente se procedi� a realizar diferentes muestras con la misma metodolog�a indicada anteriormente para la dosificaci�n de las pajuelas.

Tratamiento 2 Aloe 20%

Se utiliz� el 20% de Aloe Vera m�s diluyente comercial utilizado en el tratamiento testigo como tratamiento de los cuales se estableci� la relaci�n 1: 1 para soluci�n madre, se calcul� la concentraci�n esperm�tica con un espermiodensimetro KARRAS de marca minitube seg�n la metodolog�a indicada por la empresa fabricante, para la diluci�n del semen entre el n�mero de pajuela.

M�todos de conservaci�n evaluados

Se evaluaron tres ambientes de conservaci�n del espermatozoide, fresco, refrigerado y congelado. Las observaciones se realizaron para el semen fresco desde las 0 horas a las 12 horas en rango de dos horas cada observaci�n, donde se realiz� veinte y cuatro repeticiones, as� mismo se realiz� la observaci�n de semen refrigerado a los d�as 1, 3, 5, 7 y 9 y del congelado a los d�as 1, 3 y 10 dentro del laboratorio para la investigaci�n.

Proceso de Congelado

La congelaci�n del semen se la realiz� mediante la adaptaci�n de varios rangos de temperaturas, comenzando con dos horas a 35�C, transcurrido ese tiempo se llev� las muestras a 4�C por cuatro horas para la adaptaci�n al frio por refrigeraci�n, transcurrido el tiempo determinado se sacaron las muestras de este equipo realizando el escarchado del semen a -80�C por treinta minutos en el cuello del termo de nitr�geno de veinte kilos el cual se encontraba recargado a su m�xima capacidad, pasado este tiempo se sumergieron las muestras en el nitr�geno l�quido con una temperatura de -196�C para su almacenamiento.

Proceso de descongelado

Para la descongelaci�n las pajuelas se sometieron a Ba�o Mar�a en seco a 37� C previamente calentado por 10 minutos, se procedi� al secado de la botella y posterior obtenci�n de la muestra para la observaci�n de los espermatozoides.

Tabla 1 Distribuci�n de muestra

Se evaluaron tres tratamientos a continuaci�n detallados:

�       Testigo (diluyente comercial Vitasem)

�       T1.- Aloe vera al 17% m�s Glucosa al 3% + diluyente comercial Vitasem

�       T2.- Aloe vera al 20% + diluyente comercial Vitasem

 

Resultados

Los resultados obtenidos se dividen en la descripci�n morfol�gica del semen porcino y la supervivencia de este a los diferentes m�todos de conservaci�n, utilizando protectores naturales.

Concentraci�n esperm�tica

Media de las eyaculaciones del verraco para la concentraci�n esperm�tica

Tabla 2 Media de concentraci�n esperm�tica

El volumen de los eyaculados fue similar entre ellos 100 ml teniendo en la primera colecta una concentraci�n de 253 x 10⁶ y de 245 x 10⁶ en la segunda colecta dando como promedio 249 x 10⁶

Calidad Seminal

La evaluaci�n seminal de los eyaculados se homogeniz� para su evaluaci�n obteniendo soluci�n con la calidad ideal para su procesamiento.

Tabla 3 Medias de normalidad esperm�tica

Los par�metros de la calidad seminal estuvieron dentro del rango aceptable para asegurar la eficacia reproductiva de las pajuelas.

Evaluaci�n en fresco

Los valores de movilidad de los espermatozoides por diferentes rangos en los tratamientos se evaluaron por horas con intervalo de dos horas desde las cero hasta las doce horas.

Tabla 4 Supervivencia de semen en fresco

Hora	Testigo		Aloe 17		Aloe 20		Valor p
	Media	SD	Media	SD	Media	SD
0	95	2	95	2	95	2	NS
2	95	2	80	5	90	1.2	0.00305**
4	95.6	1.2	60	5	90	0	NS
6	90	0.6	25	13	90	0	NS
8	90	0.6	10	2.5	90	0	NS
10	90	0	0.3	0.6	90	0	NS
12	85	5	0	0	85.3	2.5	NS

T1: Aloe Vera 17% + Glucosa 3% t2: Aloe Vera 20%

Con respecto a los datos obtenidos en la experimentaci�n se puede observar que el grupo testigo y los dos tratamientos tuvieron a las cero horas el mismo valor de porcentaje, cuando se midi� a las dos hora el experimental T1 tuvo un descenso del 15% con respecto al testigo y este un 5% al T2, al cabo de las seis horas el testigo descendi� al mismo porcentaje que es del 90%, a las diez horas ambas muestras descienden al 85 %, como se muestra en la tabla y donde el semen no tuvo diferencia de supervivencia entre el grupo testigo y el grupo experimental T2, adem�s se observaron las mismas ondas esperm�ticas y la misma movilidad de los espermatozoides, el grupo T1 no sobrevivi� a las diez horas teniendo un descenso de motilidad desde las dos horas debido a la aportaci�n excesiva de energ�a lo que provoco degaste de los movimientos de la cola del espermatozoide.

Evaluaci�n refrigerada

La refrigeraci�n permiti� el descenso de la actividad esperm�tica inhibiendo su movimiento asegurando su uso prolongado de manera efectiva

Tabla 5 Supervivencia de semen en refrigeraci�n

T1: Aloe Vera 17% + Glucosa 3% T2: Aloe Vera 20%

Con respecto al resultado de la evaluaci�n en refrigeraci�n se puede observar que el grupo testigo y el T2 no presentan diferencias entre los d�as 1 y 3 respectivamente, teniendo un descenso de un 5% al quinto d�a el T2 con respecto al grupo testigo, entre los d�as 7 y 9 descendieron un 5% en relaci�n el grupo testigo con el T2, el T1 presento mortalidad desde el primer d�a de observaci�n.

Evaluaci�n congelada

La falta del crioprotector en el grupo testigo limito el uso de este en la congelaci�n.

Tabla 6 Supervivencia de semen en Congelaci�n

T1: Aloe Vera 17% + Glucosa 3% T2: Aloe Vera 20%

El grupo experimental aloe 20% dio una motilidad del 5% en las primeras veinticuatro horas de congelaci�n, demostrando una baja de la motilidad esperm�tica por mayor tiempo de congelaci�n.

Gr�fico 1 Sobrevida del semen porcino en diferentes ambientes

 

Discusi�n

Los resultados obtenidos en este trabajo indican la acci�n del diluyente en la congelaci�n y como afecta la funci�n esperm�tica durante el proceso de crioconservaci�n. Se observaron 3 grupos en diferentes condiciones, el T1 incluy� el componente diluyente a base de glucosa m�s aloe vera donde dichos resultados indican que la fuente de az�car (crioprotector no penetrante) podr�a afectar la supervivencia de los espermatozoides, posiblemente debido al efecto protector frente al choque por fr�o. Mientras que el otro grupo T2 con una fuente de glicerol como aloe vera se pudo observar que hubo supervivencia del espermatozoide hasta el tercer d�a de congelado.

Los crioprotectores juegan un papel importante en la protecci�n de las membranas durante el proceso de congelaci�n y descongelaci�n. Aunque no se han reportado datos sobre el uso de este aditivo en la especie porcina, se han podido obtener resultados positivos en la motilidad al criopreservar semen en otras especies: En el ovino gener� una motilidad entre 60% al agregar aloe vera en un 40% de concentraci�n (Guti�rrez et al., 2006), en el Caprino 47% de motilidad usando aloe vera en un 20% del diluyente de congelaci�n (Duenhas et al., 2015). A diferencia de la motilidad obtenida del 2% post congelaci�n que obtuvo el T2 al tercer d�a, este resultado se debe a la poca capacidad que tiene esta especie en la crioconservaci�n en sus c�lulas esperm�ticas, otro motivo de la muerte celular es la perdida normal de la morfolog�a por la deshidrataci�n perdiendo liquido celular.

G�mez et al., 2012, indican que la utilizaci�n de azucares como glucosa, galactosa o fructosa con un control crioconservado en el extensor de lactosa, estos extensores de congelaci�n suplementados para cada monosac�ridos presentaron un efecto crioprotector m�s peque�o que el extensor de control suplementado con lactosa (P <0.05), donde los tres monosac�ridos que se estudi� la glucosa proporcionaron la mejor calidad de esperma despu�s de la congelaci�n y descongelaci�n.

En la evaluaci�n del extracto de Aloe vera como crioprotector para el enfriamiento y la congelaci�n del semen (Souza et al., 2016), estableci�; que se logr� una conservaci�n adecuada del semen y valores cercanos al 40% de espermatozoides m�viles con viabilidad y respuesta osm�tica que oscilaron entre el 20% y el 40%, y se encontr� una morfolog�a normal del 80% despu�s de 36 horas de almacenamiento, en el Uso de un extensor a base de Aloe vera para enfriar y congelar el semen de pecar�.

 

Conclusiones

El uso de aloe vera como protector de las c�lulas esperm�ticas para la crio conservaci�n tiene un efecto limitado y una poca efectividad para esta especie, la movilidad post congelado disminuyo dr�sticamente desde las veinticuatro horas hasta los 10 d�as del estudio, obteniendo el primer d�a el 5% de movilidad no apta para la fecundaci�n.

La diferencia de la actividad celular en fresco y en refrigeraci�n con los diferentes tratamientos denoto efectos iguales entre el testigo y el semen usando aloe vera no obstante el efecto fue negativo en la combinaci�n del aloe vera m�s glucosa.

La combinaci�n de glucosa con aloe vera usados como crioprotector dio un efecto de energizaci�n a las c�lulas debilit�ndolas r�pidamente obteniendo una deshidrataci�n celular y posterior muerte, el efecto a la crioconvervaci�n fue negativo, aunque es usado en otras especies la anatom�a y fisiolog�a especifica de los gametos de los cerdos hizo que actuaran diferente a lo esperado.

En conclusi�n, la adici�n del extracto del Aloe vera puro (Aloe barbadensis miller) en un 20% del volumen total de agua necesario para la preparaci�n de un medio a base de del diluyente comercial usado para congelar semen porcino, no produjo diferencia significativa en los par�metros de motilidad, viabilidad y anormalidad

 

Referencias

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