Sensibilidad y resistencia antibiótica de los microorganismos hallados en aceites vegetales usados en los negocios de comida rápida

 

Antibiotic sensitivity and resistance of microorganisms found in vegetable oils used in fast food businesses

 

Susceptibilidade e resistência a antibióticos de microrganismos encontrados em óleos vegetais usados em empresas de fast food

Nelly Ivonne Guananga-Díaz I
nguananga@espoch.edu.ec 
https://orcid.org/0000-0003-0451-7878 
,Cecilia Alejandra García-Ríos II
cecilia.garcia@espoch.edu.ec 
https://orcid.org/0000-0001-5179-0303
Jaqueline Elizabeth Balseca-Castro III
j_balseca@espoch.edu.ec 
https://orcid.org/0000-0001-8402-770X  
,Freddy Román Guananga-Díaz IV
freddy.guananga@espoch.edu.ec 
https://orcid.org/0000-0002-5721-4689
 

 

 

 

 

 

 

 

 

 


Correspondencia: nguananga@espoch.edu.ec    

 

 

Ciencias Técnicas y Aplicadas             

Artículo de Investigación

                                                                         

*Recibido: 30 de enero de 2022 *Aceptado: 18 de febrero de 2022 * Publicado: 16 marzo de 2022

 

         I.            Directora del Proyecto, Dra. Química, Especialidad Orgánica Bioquímica, Maestría en Ciencias en Biotecnología, Miembro del grupo de Investigación “LEISHPAREC”, Docente Investigador de la Facultad de Ciencias, Escuela Superior Politécnica de Chimborazo (ESPOCH), Riobamba, Ecuador.

       II.            Médica Cirujana, Especialista en Pediatría, Miembro del grupo de Investigación “LEISHPAREC”, Docente Investigador de la Facultad de Salud Pública, Escuela Superior Politécnica de Chimborazo (ESPOCH), Riobamba, Ecuador.

     III.            Doctora en Contabilidad y Auditoría, Maestría en Pequeñas y Medianas Empresas mención Finanzas, Miembro del grupo de Investigación “LEISHPAREC”, Docente Investigador de la Facultad de Ciencias Escuela Superior Politécnica de Chimborazo (ESPOCH), Riobamba, Ecuador.

    IV.            Ingeniero Industrial, Maestría en Gestión Industrial y Sistemas Productivos, Investigador Externo del grupo de Investigación “LEISHPAREC”, Riobamba, Ecuador.


Resumen

El objetivo de la presente investigación es repasar la sensibilidad y resistencia antibiótica de los microorganismos hallados en los aceites vegetales usados en los negocios de comida rápida en las parroquias Lizarzaburo, Maldonado, Velasco, Veloz y Yaruquíes de la ciudad de Riobamba. La muestra estuvo conformada por 40 locales, durante un periodo de 6 meses aproximadamente y fue tomada en cada local 150 mL de aceite vegetal usado en las frituras de papas para proceder a la caracterización físico-química y microbiológica. Los valores medios de los parámetros físicoquímicos fueron: pH 7,17, temperatura 18,60° C, densidad relativa 0,91, índice de acidez de 1,49 e índice de peróxido 39,94 mEq O2/Kg. En la etapa de análisis microbiológico se analizaron las muestras en un lapso de 15 días, visibilizando el crecimiento de algunos microorganismos como el Staphylococcus aureus, Staphylococcus saprophyticus, Staphylococcus epidermidis, Proteus mirabilis, Acinetobacter spp y aerobios mesófilos. Los resultados en cuanto a resistencia y sensibilidad a antibióticos mostraron una mayor resistencia a amoxicilina + ácido clavulánico, amikacina, gentamicina y eritromicina. Se pudo comprobar la existencia de alteraciones físico-químicas y microbiológicas que comprometen su calidad y el valor nutricional de los alimentos, además de ser nocivas para la salud de los consumidores.

Palabras clave: Aceite vegetal usado; Análisis físico-químicos; Análisis microbiológico; Microorganismos patógenos.

 

Abstract

The objective of this research is to review the sensitivity and antibiotic resistance of microorganisms found in vegetable oils used in fast food businesses in the parishes of Lizarzaburo, Maldonado, Velasco, Veloz and Yaruquíes in the city of Riobamba. The sample consisted of 40 stores, during a period of approximately 6 months, and 150 mL of vegetable oil used in potato frying was taken from each store for physicochemical and microbiological characterization. The mean values of the physicochemical parameters were: pH 7.17, temperature 18.60°C, relative density 0.91, acidity index 1.49 and peroxide index 39.94 mEq O2/kg. In the microbiological analysis stage, the samples were analyzed over a period of 15 days, revealing the growth of some microorganisms such as Staphylococcus aureus, Staphylococcus saprophyticus, Staphylococcus epidermidis, Proteus mirabilis, Acinetobacter spp and mesophilic aerobes. The results in terms of antibiotic resistance and sensitivity showed a greater resistance to amoxicillin + clavulanic acid, amikacin, gentamicin and erythromycin. The existence of physico-chemical and microbiological alterations that compromise the quality and nutritional value of the food, besides being harmful to the health of consumers, was confirmed.

Key words: Used vegetable oil; Physical-chemical analysis; Microbiological analysis; Pathogenic microorganisms.

 

Resumo

O objectivo desta investigação é rever a sensibilidade e resistência antibiótica dos microrganismos encontrados nos óleos vegetais utilizados nos negócios de fast food nas paróquias de Lizarzaburo, Maldonado, Velasco, Veloz e Yaruquíes, na cidade de Riobamba. A amostra consistiu em 40 instalações durante um período de aproximadamente 6 meses e 150 mL de óleo vegetal utilizado na fritura da batata foram retirados de cada instalação para caracterização físico-química e microbiológica. Os valores médios dos parâmetros físico-químicos foram: pH 7,17, temperatura 18,60°C, densidade relativa 0,91, índice de acidez 1,49 e índice de peróxidos 39,94 mEq O2/kg. Na fase de análise microbiológica, as amostras foram analisadas durante um período de 15 dias, revelando o crescimento de alguns microrganismos tais como Staphylococcus aureus, Staphylococcus saprophyticus, Staphylococcus epidermidis, Proteus mirabilis, Acinetobacter spp e Mesophilic aerobes. Os resultados da resistência e sensibilidade aos antibióticos mostraram uma maior resistência à amoxicilina + ácido clavulânico, amikacina, gentamicina e eritromicina. Foi confirmada a existência de alterações físico-químicas e microbiológicas que comprometem a qualidade e o valor nutricional dos alimentos, para além de serem prejudiciais para a saúde dos consumidores.

Palavras-chave: Óleo vegetal usado; Análise físico-química; Análise microbiológica; Microrganismos patogénicos.

 

Introducción

El aceite, luego de ser sometido al proceso de fritura, presenta una serie de cambios físicos y químicos que han sido estudiados y analizados a lo largo del tiempo. En este contexto, la sensibilidad y resistencia antimicrobiana es uno de los temas que actualmente se encuentra en un punto crítico, en tanto que es de las causas de uno de los diez problemas de atención especial para la OMS. Esto es debido, entre otras cosas, a que varios microorganismos con alto potencial de ser patógenos desarrollan resistencia a gran parte de los fármacos tratantes de las afecciones que provocan, incrementando el riesgo de morbilidad e incluso mortalidad a nivel mundial (Calero et al., 2019; Contreras et al., 2021). Lázaro (2018), en un estudio desarrollado sobre los aceites vegetales durante la fritura, estableció que los productos resultantes formados en el proceso de fritura, son responsables de ocasionar alteraciones a las características físicas, químicas y organolépticas; estos cambios se deben especialmente a las reacciones de termo-oxidación, hidrólisis y polimerización.

Respecto a las condiciones higiénico sanitarias, un estudio realizado en Lima sobre alimentos adquiridos en vías públicas, menciona que la presencia de microorganismos considerados inaceptables para el consumo humano, acorde a la Norma Sanitaria local (Galarza, 2018). Un estudio similar realizado en Bogotá, estableció que el mayor porcentaje de puestos de alimentos ambulantes tienen un alto riesgo sanitario relacionado a la presencia de bacterias, requiriendo un mayor control por parte de las autoridades y un mayor grado de capacitación y concientización a vendedores y consumidores (Campuzano et al., 2015). Otro estudio realizado también en Bogotá concluye en su estudio sobre condiciones higiénico sanitarias de la venta callejera de alimentos que casi un 100% de los vendedores mostraron un lavado de manos adecuado, un deficiente acceso de agua y sobre todo un incorrecto manejo de desechos.

En este mismo orden de ideas otro estudio realizado en Venezuela, cuyo ámbito de estudio se centra en entornos comerciales y universitarios), evalúa índices físicos y químicos característicos de los aceites; y concluye que el desconocimiento de usuarios  sobre manipulación adecuada del aceite en frituras, sumado a la falta de normativa y control por parte de los entes pertinentes, ocasiona que algunos establecimientos eliminen el aceite usado en condiciones excesivas de degradación termo-oxidativa (Rivera et al., 2014). Esto sumado a modificaciones que se hacen presentes en el proceso térmico, pueden tener efectos en la salud relacionados principalmente a enfermedades cardiovasculares (Esquivel et al., 2014). Respecto a este hecho, un artículo publicado por la Universidad Nacional de Educación de Distancia (UNED) de Madrid concluye que las alteraciones en los alimentos se deben principalmente a las reacciones producidas por luz y calor en las etapas de conservación y almacenamiento de dichos alimentos (Garcinuño, 2017) (Rodríguez, 2015). Ciappini et al., (2016) en un estudio sobre las modificaciones producidas durante las frituras domésticas, hace la diferenciación entre aceite de girasol refinado y aceite de oliva virgen extra, determinando que, a partir de la segunda fritura, ambos sufren alteraciones físico-químicas, y a partir de la cuarta fritura, únicamente el aceite de oliva virgen extra percibe cambios sensoriales.

En un ámbito más local, se tienen los casos de Cuenca, Riobamba y Ambato, donde fue analizado el aceite vegetal en la preparación de papas fritas, uso doméstico general e incidencia de microorganismo patógenos respectivamente. En Cuenca se determinó una alta presencia de peróxidos influyendo como principales factores el tiempo de cocción y la temperatura (Astudillo, 2018). En Riobamba se estudiaron los hábitos de consumo y manejo de los aceites, determinando que el 39.09% los hogares riobambeños desechan el aceite cada dos frituras y únicamente el 27.42% lo separa si lo considera sucio o se ha quemado (Guananga et al., 2018). En Ambato se analiza la incidencia de microorganismos patógenos en comidas preparadas en el mercado central de la ciudad de Ambato, donde se conformó la presencia de los mismos y portante de inadecuadas prácticas de higiene. Además de los ya mencionados, no existen estudios adicionales sobre los negocios de comida rápida y la salud alimentaria, considerando el alto porcentaje (54%) de consumidores de este tipo de alimentos en el cantón Riobamba.

Las enfermedades que normalmente son transmitidas por alimentos, también conocidas como ETAs (Enfermedades Transmitidas por Alimentos) son ocasionadas por múltiples factores, entre los destacan la inadecuada conservación e incorrecta manipulación de los mismos. Las principales infecciones relacionados con los alimentos son ocasionados por microorganismos como Escherichia coli, Bacillus cereus, Salmonella typhi, Salmonella enteritidis, Clos-tridium perfringens, Staphylococcus aureus, Shigella spp, Mesófilos aerobios, Coliformes totales y Coliformes fecales (Campuzano, 2015). En países en desarrollo, estas enfermedades suelen parecerse en grado extremo por lo que, para hacer frente a esta problemática, como mínimo, es requerido el esfuerzo conjunto de gobiernos, productores y consumidores (Rodríguez et al., 2015). Estas enfermedades constituyen un problema de salud pública importante alrededor del mundo ya que son de perfil infeccioso o tóxico. Sus casas de manera general están asociadas a agentes patógenos, virus, parásitos, hongos, bacterias o sustancias químicas que ingresan en el cuerpo humano a través de los alimentos (Ramos, 2019).

La OMS informa que en general, todos estamos en condiciones de contraer una ETA, tanto es así que anualmente se enferman 600 millones de personas a nivel mundial, siendo al menos 1 de cada 10 enfermedades ocasionadas por ingestión de alimentos contaminados, terminando aproximadamente 420.000 en fallecimientos. De todos estos casos, la tendencia es de mayor impacto en niños, ancianos, mujeres embarazadas e inmunodeprimidos, alcanzando, por ejemplo 125.000 muertes de niños anuales en el año 2015. En este sentido el enfoque preventivo de los riesgos de origen alimentario es la estrategia principal de la salud pública. Desde un punto de vista económico las ETAs representan un gasto económico representativo para el estado, siendo el segundo o tercer motivo de consulta en servicios sanitarios públicos y privados de todo tipo (Pérez et al., 2017). Los productos alimenticios relacionados a la comida rápida, generalmente están asociados a alimentos fritos, están relacionados directamente a ciertos problemas de salud, sin embargo, estos son preferidos por la población debido a la rapidez en la que pueden satisfacer sus necesidades alimenticias.

En cuanto a normativas respecto al manejo de estos alimentos, actualmente no hay una ordenanza específica, por tanto, estos resultados intentan establecer una base para el desarrollo de herramienta que pueda ser usada por el Gobierno Autónomo Descentralizado (GAD) de Riobamba, en favor de mejorar la gestión del control de los alimentos de comida rápida que son ofertados dentro de la ciudad, buscando el beneficio tanto del expendedor precautelando la salud del consumidor. Es importante mencionar que la venta de comida rápida, en el caso Riobamba. constituye el 41% del empleo informal, así que, ofertar sus frituras mejor preparadas también asegura su actividad económica (Vallejo et al., 2020).

Esta investigación profundizará y proporcionará evidencia científica sobre aspectos relevantes sobre la calidad de este tipo de aceites, el manejo de los procesos de cocción y fritura, y todos los peligros para la salud que los aceites reutilizados excesivamente conllevan. En primer lugar, se determinará el manejo que se dan a los aceites y grasas empleadas en los negocios de comida rápida a través de encuestas; para establecer las características referentes a la calidad de los aceites vegetales usados y reutilizados; se analizarán los parámetros físicos, químicos y bacteriológicos mediante muestras tomadas in situ de manera aleatoria. Esto se repite 15 días después de la primera recolección de muestras con el fin de conocer los cambios de calidad a través del tiempo. A grandes rasgos el objetivo general de este estudio es analizar la calidad de los aceites vegetales usados en los negocios de comida rápida en las parroquias Lizarzaburo, Maldonado, Velasco, Veloz, Yaruquies de la ciudad de Riobamba, evaluar la resistencia y sensibilidad de bacterias patógenas y el impacto que estas generan en la salud del consumidor.

 

 

Marco Teórico

Los aceites pueden ser de origen animal o vegetal y están conformados principalmente por triésteres de ácidos grasos y el glicerol, llamados también “triglicéridos”, particularmente los aceites vegetales, que en estado líquido se encuentran a temperatura de 20° C (Delgado, 2019), son obtenidos a partir de semillas, nueces o frutas, mediante procesos de prensado, extracción con ayuda de solventes o una combinación de ambos métodos (Nour et al., 2018). El valor nutricional varía entre tipos de aceites, dependiendo considerablemente de la concentración de ácidos grasos y de la digestibilidad (proporción de los ácidos grasos absorbidos eficientemente luego de la digestión). Esta digestibilidad está determinada por factores como la proporción de acilglicéridos, el porcentaje de ácidos grasos libres, y la estructura/composición de ácidos grasos (Martínez y Maestri, 2016). Es importante mencionar que, en comparación con otros aceites, los de origen vegetal, cuentan con ácidos grasos libres (no esterificados) en proporción mucho menor a la de los triglicéridos, ceras, fosfátidos y un residuo conocido como material insaponificable (suele incluir esteroles, pigmentos, hidrocarburos, vitaminas liposolubles, entre otras).

Los ácidos grasos pueden clasificarse en saturados y no saturados. Los saturados son el tipo de ácido graso más común y su característica principal es que químicamente no tiene un doble enlace carbono – carbono, por lo que en temperatura ambiente se encuentran en estado sólido (Delgado, 2019; Santos, 2018). Los no saturados por su parte, si tienen doble enlace en su estructura química y a temperatura ambiente, se mantienen líquidos, el consumo de estos últimos está asociado a los niveles de colesterol bueno (HDL); ya que no se degradan químicamente en el proceso de fritura, un ejemplo de ello es el aceite de oliva. Algo particular sobre los no saturados es que pueden tener un solo enlace doble (monoinsaturados) o dos o más enlaces dobles (poliinsaturados). Los Aceites Vegetales Usados (AVUs) son aquellos que proceden de todo ente que genere o suministre aceites comestibles que, en su uso, hayan pasado por un proceso térmico de desnaturalización, alterando sus características físico-químicas de origen. En este sentido, los aceites reutilizados excesivamente son considerablemente menos eficientes, permitiendo mayor absorción de grasa (4-30%) por parte de los alimentos y excesos de cocción en las superficies externas de los productos.

 

Materiales y Métodos

La investigación fue de tipo experimental con componentes descriptivo, inductivo y analítico, manipulando la variable tiempo, respecto a la calidad de los aceites vegetales usados luego del proceso de fritura. Los análisis físico-químicos y microbiológicos se tabularon a través de hojas de registro, posteriormente trasladadas a una base de datos (SPSS) para facilitar el análisis estadístico-descriptivo y gráfico.  Respecto al muestreo, se usó el protocolo establecido en la guía para muestreos de alimentos FAO (Organización de las Naciones Unidas para la Agricultura y la Alimentación); donde se establece que la muestra tomado in situ debe ser de 100 ml – 150 ml en recipientes plásticos estériles y transportados en un Cooler a temperaturas de 2- 8 °C.

La población para el muestreo final estuvo conformada por aquellos locales donde hubo colaboración de propietarios y/o empleados, alcanzando los 40 negocios distribuidos en las 5 parroquias de la siguiente manera: 11 (Lizarzaburo), 5 (Maldonado), 15 (Velasco), 7 (Veloz) y 2 (Yaruquíes). Es importante mencionar que se tomó únicamente aceites utilizados para la elaboración de comida rápida, mismo que se encontraba a temperatura ambiente al momento de tomar la muestra.

Los materiales usados se resumen en las siguientes tablas:

 

Tabla N° 1: Equipos, Medios de cultivo y Reactivos usados en los análisis microbiológicos.

ANÁLISIS MICROBIOLÓGICO

Equipos

Medios de Cultivo

Reactivos

Balanza analítica

Agar Eosina azul de metileno

Tinción Gram

Cámara de flujo laminar

Agar Standard Methods

Cristal Violeta

Estufa bacteriológica

Agar manitol

Alcohol acetone

Autoclave

Agar S.S.

Safranina

Microscopio

Agar Mueller Hinton

Aceite de inmersión

Baño María

Caldo verde bilis brillante

 

 

Agua peptonada

 

 

Enriquecimiento Base para Salmonella

 

 

Suplemento de enriquecimiento de Salmonella

 

 

Agar soya

 

ANÁLISIS FÍSICO - QUÍMICO

Reactivos

Equipos

Solución indicadora de almidón.

Desecador

Tiosulfato de sodio 0,1 N

Baño María

Yoduro de potasio saturada

Estufa

Ácido acético

Balanza analítica

Cloroformo

Agitador

Hidróxido de sodio 0,1 N

 

Fenolftaleína

 

Alcohol-éter(1:1)

 

Fuente: Pilco, 2021.

Respecto al inciso particular de análisis de sensibilidad y resistencia antibiótica de microorganismos se siguió la siguiente metodología: Identificación de Bacterias, preparación de agar Soya Tripticasa, siembra de bacterias en el agar de los tubos de ensayo para aislar y purificar las bacterias, refrigeración de las muestras, preparación de placas para el estriado con un hisopo estéril, colocación de los discos de antibióticos para el ensayo de sensibilidad, incubación de las cajas durante 24 horas a una temperatura de 37° C, y finalmente la observación y medición de diámetros de la zona de inhibición que rodea a cada disco.

 

Resultados

A los locales analizados, por confidencialidad, se les asignó un número aleatorio; las muestras recolectadas, proceden esencialmente de la fritura de papas, lo cual implica un método de fritura discontinua. En términos generales, todas las muestras presentaron un color turbio (ámbar oscuro) y un olor rancio, así también, se identificaron partículas de alimentos debido a que se reutiliza el aceite para varias frituras. No existe un valor de referencia claro establecido de pH en aceites vegetales comestibles debido a que, no son soluciones acuosas, sin embargo, en la Tabla N° 2 se puede observar que el promedio es de valores tendieron en su mayoría hacia la alcalinidad entre 7,17 teniendo un máximo de 8,06 y un mínimo de 5,99.

 

Tabla N° 2: Parámetros físico químicos determinados en cada muestra.

MEDIA DE RESULTADOS DE ANÁLISIS FÍSICO- QUÍMICOS

Muestra

pH

Conductividad μs

STD* mg/L

Temperatura °C

Densidad relativa

Índice de acidez mg NaOH/g aceite

Índice de peróxido meq O2/Kg aceite

1

7,36

0,10

0,0

18,65

0,9107

1,340

12,05

2

7,12

0,10

0,0

18,35

0,9221

1,230

193,62

3

7,11

0,10

0,0

18,1

0,9217

1,230

164,05

4

6,51

0,10

0,0

18,55

0,9115

1,000

20,01

5

8,06

0,10

0,0

18,25

0,9171

1,230

69,90

6

6,82

0,10

0,0

19,15

0,9147

1,450

40,01

7

7,12

0,10

0,0

19,1

0,9113

1,230

26,05

8

6,65

0,10

0,0

18,35

0,9113

1,120

25,97

9

7,14

0,10

0,0

18,5

0,9119

1,010

24,05

10

7,32

0,10

0,0

18,65

0,9117

1,240

22,04

11

7,15

0,10

0,0

18,35

0,9115

1,230

23,98

12

7,01

0,10

0,0

18,9

0,9143

1,340

38,05

13

7,16

0,10

0,0

18,55

0,9116

1,120

23,97

14

7,11

0,10

0,0

18,75

0,9167

1,120

62,05

15

7,18

0,10

0,0

18,3

0,9112

1,120

22,04

16

7,35

0,10

0,0

18,65

0,9112

1,230

17,91

17

7,16

0,10

0,0

18,9

0,9165

1,230

57,83

18

7,09

0,10

0,0

18,85

0,9142

1,010

38,05

19

7,21

0,10

0,0

18,9

0,9119

1,120

22,05

20

7,20

0,10

0,0

18,55

0,9169

1,240

62,05

21

7,00

0,10

0,0

18,55

0,9043

1,178

49,00

22

7,35

0,10

0,0

18,40

0,9148

1,347

27,00

23

7,20

0,10

0,0

18,15

0,9096

2,188

3,00

24

7,07

0,10

0,0

18,65

0,9121

2,301

31,00

25

7,41

0,10

0,0

18,35

0,9107

1,403

49,00

26

7,40

0,10

0,0

19,25

0,9015

2,188

27,00

27

7,85

0,10

0,0

18,85

0,8947

2,413

119,00

28

7,26

0,10

0,0

18,25

0,8902

2,076

15,00

29

6,93

0,10

0,0

18,55

0,9279

1,852

21,00

30

6,88

0,10

0,0

19,15

0,9101

2,132

43,00

31

7,12

0,10

0,0

18,40

0,9026

1,178

13,00

32

7,10

0,10

0,0

18,75

0,9113

1,515

51,00

33

6,85

0,10

0,0

18,35

0,9107

1,178

17,00

34

5,99

0,10

0,0

18,85

0,9105

1,403

13,00

35

7,35

0,10

0,0

18,25

0,9320

2,132

31,00

36

6,92

0,10

0,0

18,35

0,9110

1,178

27,00

37

7,89

0,10

0,0

18,65

0,9488

2,244

19,00

38

7,64

0,10

0,0

18,25

0,8905

2,020

23,00

39

7,71

0,10

0,0

18,9

0,9728

1,234

45,00

40

7,13

0,10

0,0

18,65

0,9233

2,413

9,00

ESTADÍSTICAS TOTALES

Promedio

7,17

0,10

0,00

18,60

0,91

1,49

39,94

Mínimo

5,99

0,10

0,00

18,10

0,89

1,00

3,00

Máximo

8,06

0,10

0,00

19,25

0,97

2,41

193,62

Fuente: Pilco, 2021; Chimborazo, 2021

 

 

En cuanto a la conductividad y los sólidos totales disueltos (STD) se tienen valores estáticos de 0,0 y 0,1 respectivamente. Esto está dentro de lo esperado ya que no se están analizando soluciones acuosas, por tanto, los resultados tienden hacia 0. Respecto al parámetro de la temperatura, el valor promedio es de 18,60 ° C teniendo un mínimo de 18,10 ° C y un máximo de 19,25 ° C, representando una temperatura ambiente. En el caso de la densidad relativa, en vegetales puros esta suele variar entre 0,850-0,920 (Codex, 2019), no obstante, según la normativa NTE INEN 35 el límite máximo permitido es de 0,91, por lo cual, el promedio se encuentra en el umbral este rango, teniendo valor de hasta 0,97; únicamente 6 locales estaría por debajo de este valor.

Respecto al índice de acidez encontrado en las muestras, se puede decir que basados en la norma NTE INEN 38, el 100% de los locales sobrepasan los valores máximos de 0,20%. Este valor es importante ya que corresponde a un parámetro que determina el deterioro de un aceite caracterizado principalmente por un sabor desagradable (Rivera, 2014). En estudios similares se ha determinado que este índice tiene una tendencia al alza tras la primera fritura, pasando ya en la segunda a un 0,50% (Arango, 2015). El promedio en este caso es de 1,49 y el máximo de 2,41.

En cuanto al índice de peróxido, cuyo valor máximo según la norma NTE INEN 277 es de 10 mEqO2/Kg, encontramos muestras con valores excesivamente elevados, teniendo un promedio de 39,94 llega incluso a valores de 193,62 mEqO2/Kg, convirtiéndose en un palpable riesgo para la salud de los consumidores; únicamente 2 locales estarían dentro del rango aceptado.

Respecto a estas características físico -químicas, un estudio de similar enfoque, realizado en México, determinó que se puede incrementar hasta 15 veces la cantidad de los ácidos grasos libres durante la fritura profunda, así como el índice de acidez en 14 veces y el índice de peróxido hasta 8 veces (Santana et al., 2019; Segurondo y Cortez, 2020). En cuanto a los análisis microbiológicos, es importante mencionar que los análisis se hicieron al día 0 y 15, en favor de identificar los siguientes microorganismos patógenos: Salmonella – Shigella, Escherichia coli, Staphylococcus aureus 103 UFC/g, para microorganismos Aerobios mesófilos 103 UFC/g, Coliformes Totales, Pseudomonas, S. epidermidis, S. saprofítico, Streptococo viridans y Chromobacterium.

Los resultados mostraron la total ausencia de Escherichia coli, y Coliformes totales están ausentes en las muestras en estos dos tiempos, cumplimiento de la norma (NTE INEN 1529-6), Control microbiológico de los alimentos), todos los locales de estudio están dentro de los límites permitidos menos de 100 para coliformes y menor a 3 para E. coli (DIGESA-V.01, 2003), concluyendo que el alimento sugiere un riesgo para la salud de quien lo consume. Por ello, es importante mencionar que, los microorganismos coliformes totales se utilizan como indicadores de la calidad sanitaria ya sea de un alimento o del agua para consumo y elaboración de estos, o a su vez puede ayudar a determinar la durabilidad de este. Deben cumplir con indicadores específicos, como la presencia (detectabilidad) de estos microorganismos en el alimento en estudio, pero su crecimiento debe ser inversamente proporcional a la calidad que presenta este alimento.

Chromobacterium está ausente en 0 días, y, a los 15 días se detecta en el 20% de las muestras, su presencia a los quince días podría ser por las técnicas de aislamiento que se utilizó ya que al aislar y purificar las muestras se utilizó medios selectivos y se realizó la respectiva diferenciación de colonias a las cuales se sometieron a seguir violándolas, es decir que a los 0 días se aisló las otras bacterias resultantes en las muestras. Los resultados muestran la ausencia de microorganismo patógenos como la Escherichia coli que es causante de infecciones a nivel del tracto digestivo, sin embargo, todos los demás se han encontrado en al menos uno de los locales (Ver Tabla N° 3 y N° 4).

 

Tabla N° 3: Ausencia (0) y presencia (1) de microorganismos detectados día 0

TIEMPO DÍA 0

Muestra

Staphylococcus aureus*

Aerobios Mesófilos

Enterobacterias

Pseudomonas

S. epidermidis

S. saprofito

Proteus mirabilis

Chromobacterium;

Acinetobacter spp

Salmonela-Shigela

Streptococcus viridans

1

0,00

0,33

0,00

0,00

1,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

2

0,34

0,36

1,00

1,00

1,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

3

0,37

0,45

1,00

1,00

1,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

4

0,00

0,46

1,00

1,00

1,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

5

0,00

5,40

1,00

0,00

1,00

0,00

1,00

0,00

0,00

0,00

0,00

6

0,00

1,40

1,00

1,00

1,00

0,00

0,00

1,00

0,00

0,00

0,00

7

0,00

0,70

0,00

0,00

1,00

0,00

0,00

0,00

1,00

0,00

0,00

8

0,00

0,46

0,00

0,00

1,00

1,00

0,00

0,00

1,00

0,00

0,00

9

0,36

0,50

1,00

1,00

1,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

10

0,00

0,40

0,00

0,00

1,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

11

0,00

0,42

0,00

0,00

1,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

12

0,00

0,41

1,00

1,00

1,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

13

0,00

0,43

0,00

0,00

1,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

14

0,40

0,41

0,00

0,00

1,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

15

0,41

0,47

1,00

1,00

1,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

16

0,30

0,34

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

17

0,40

0,41

0,00

0,00

1,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

18

0,00

0,40

1,00

1,00

1,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

19

0,00

0,40

1,00

0,00

0,00

0,00

0,00

1,00

1,00

0,00

0,00

20

0,36

0,34

1,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

21

0,00

0,20

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

1,00

0,00

22

3,80

0,20

0,00

0,00

0,00

1,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

23

0,00

2,90

0,00

0,00

1,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

1,00

24

7,60

3,30

0,00

0,00

1,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

25

0,00

2,40

0,00

0,00

1,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

26

3,80

0,20

0,00

0,00

0,00

1,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

27

7,30

0,80

0,00

1,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

28

8,00

1,70

0,00

1,00

1,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

29

4,00

0,20

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

30

0,00

0,10

0,00

0,00

1,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

31

8,20

0,70

0,00

1,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

32

0,00

1,00

0,00

0,00

1,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

33

7,80

1,90

0,00

1,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

34

8,10

1,00

0,00

0,00

1,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

35

0,00

1,00

0,00

0,00

0,00

1,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

36

7,90

0,90

0,00

1,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

37

0,00

1,30

0,00

0,00

1,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

38

8,00

2,50

0,00

1,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

39

0,00

2,20

0,00

1,00

0,00

1,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

40

7,80

1,20

0,00

1,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

Fuente: Pilco, 2021; Chimborazo, 2021

 

 

En el día 0, se puede evidenciar que, 20 de los 40 locales de comida rápida presentan Staphylococcus aureus, 40 Aerobios Mesófilos, 11 Enterobacterias, 16 Pseudomonas, 25 S. epidermidis, 5 S. saprofítico, 3 Acinetobacter spp, 2 Chromobacterium, y 1 Proteus mirabilis, Salmonella-Shigella y Streptococo viridans (Ver Tabla N° 3). En el día 15, se puede evidenciar que, 20 de los 40 locales de comida rápida presentan Staphylococcus aureus, 40 Aerobios Mesófilos, 11 Enterobacterias, 16 Pseudomonas, 25 S. epidermidis, 5 S. saprofítico, 2 Acinotebacter spp, 6 Chromobacterium, y 1 Proteus mirabilis, Salmonella-Shigella y Streptococo viridans (Ver Tabla N° 4). En definitiva, el mayor cambio en el transcurso de los 15 días, en cuanto a número de locales se da en la presencia de Chromobacterium, dejando claro que todos los otros microorganismos analizados se mantienen o aumentan en porcentaje.

 

 

Tabla N° 4: Ausencia (0) y presencia (1) de microorganismos detectados día 15

TIEMPO DÍA 15

Muestra

Staphylococcus aureus*

Aerobios Mesófilos

Enterobacterias

Pseudomonas

S. epidermidis

S. saprofito

Proteus mirabilis

Chromobacterium;

Acinetobacter spp

Salonela-Shigela

Streptococcus viridans

1

0,00

0,59

0,00

0,00

1,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

2

0,48

0,70

1,00

1,00

1,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

3

0,52

0,89

1,00

1,00

1,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

4

0,00

0,87

1,00

1,00

1,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

5

0,00

5,60

1,00

0,00

1,00

0,00

1,00

0,00

0,00

0,00

0,00

6

0,00

2,70

1,00

1,00

1,00

0,00

0,00

1,00

0,00

0,00

0,00

7

0,00

1,40

0,00

0,00

1,00

0,00

0,00

0,00

1,00

0,00

0,00

8

0,00

0,84

0,00

0,00

1,00

1,00

0,00

0,00

1,00

0,00

0,00

9

0,49

0,94

1,00

1,00

1,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

10

0,00

0,78

0,00

0,00

1,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

11

0,00

0,74

0,00

0,00

1,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

12

0,00

0,80

1,00

1,00

1,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

13

0,00

0,84

0,00

0,00

1,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

14

0,50

0,79

0,00

0,00

1,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

15

0,55

0,89

1,00

1,00

1,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

16

0,48

0,65

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

17

0,57

0,84

0,00

0,00

1,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

18

0,00

0,82

1,00

1,00

1,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

19

0,00

0,95

1,00

0,00

0,00

0,00

0,00

1,00

0,00

0,00

0,00

20

0,54

0,57

1,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

21

0,00

0,40

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

1,00

0,00

22

4,20

0,20

0,00

0,00

0,00

1,00

0,00

1,00

0,00

0,00

0,00

23

0,00

3,90

0,00

0,00

1,00

0,00

0,00

1,00

0,00

0,00

1,00

24

8,20

3,60

0,00

0,00

1,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

25

0,00

2,90

0,00

0,00

1,00

0,00

0,00

1,00

0,00

0,00

0,00

26

3,80

0,30

0,00

0,00

0,00

1,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

27

8,40

1,00

0,00

1,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

28

8,60

2,30

0,00

1,00

1,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

29

4,00

0,30

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

30

0,00

0,30

0,00

0,00

1,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

31

8,60

1,00

0,00

1,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

32

0,00

1,20

0,00

0,00

1,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

33

8,10

2,50

0,00

1,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

34

8,20

1,80

0,00

0,00

1,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

35

0,00

1,70

0,00

0,00

0,00

1,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

36

8,30

1,20

0,00

1,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

37

0,00

1,90

0,00

0,00

1,00

0,00

0,00

1,00

0,00

0,00

0,00

38

8,10

3,20

0,00

1,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

39

0,00

2,90

0,00

1,00

0,00

1,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

40

8,70

1,90

0,00

1,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

Fuente: Pilco, 2021; Chimborazo, 2021

 

 

Respecto al análisis particular de la sensibilidad y resistencia de microorganismos aislados en las muestras de aceites vegetales usados, se hizo una diferenciación entre las parroquias de Maldonado y Velasco (muestras de la 1 a la 20) y las parroquias Lizarzaburo, Veloz y Yaruquíes (muestras de la 21 a la 40); en el primer grupo de muestras (1-20) se puede denotar lo siguiente: el Staphylococcus saprofítico tuvo resistencia a la tetraciclina, el Proteus mirabilis tuvo resistencia a la amoxicilina + ácido clavulánico, el Chromobacterium presentaba resistencia a la tetraciclina y el Acinetobacter spp presentó resistencia al cloranfenicol (Ver Tabla N° 5).

 

Tabla N° 5: Antibiograma realizado a microorganismos identificados en muestras de AVU. (1 -20)

Staphylococcus aureus*

Enterobacterias

Pseudomona agglomerans

S. epidermidis

S. saprofito

Proteus mirabilis

Chromobacterium;

Acinetobacter spp

Muestra

Resistencia

Sensibilidad

Resistencia

Sensibilidad

Resistencia

Sensibilidad

Resistencia

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1= Eritromicina, gentamicina y oxacilina, 2= Eritromicina, clindamicina y Penicilina G, 3= Nitrofurantoina, Penicilina G y Eritromicina, 4= Clindamicina y oxacilina, 5 = Amoxicilina + Ác. Clavulánico, 6= Cloranfenicol, 7= Fosfomicina, 8= Tetraciclina, 9= Amikacina y gentamicina, 10= Nitrofurantoína

Fuente: Chimborazo, 2021

 

 

El Staphylococcus aureus presenta una mayor resistencia al cloranfenicol, la nitrofurantoína, la Penicilina G y la eritromicina. Las Enterobacterias presentaron una mayor resistencia a la amikacina, gentamicina y en menor cantidad a la amoxicilina + ácido clavulánico. La Pseudomona agglomerans presentó una mayor resistencia a la eritromicina, gentamicina, oxacilina y amoxicilina + ácido clavulánico. El Staphylococcus epidermidis evidencia mayor resistencia a la eritromicina, clindamicina, Penicilina G, gentamicina y oxacilina.  El segundo grupo de muestras (21-40) fue analizado en base a un antibiograma para cocos Gram positivos y negativos obteniendo los siguientes resultados. Respecto a las bacterias Gram positivas se determinó que el Staphylococcus aureus presenta resistencia a amoxicilina/ácido clavulánico, el Staphylococcus epidermidis presenta resistencia a la tetraciclina, el Staphylococcus saprophyticus presenta resistencia a tetraciclina, y el streptococcus viridans a la gentamicina.

Por su parte, respecto a los antibióticos especiales para bacterias Gram negativas se puede observar que la Salmonella sp es resistente a Gentamicina, Cloranfenicol y Trimetoprim/sulfametoxazol, la Pseudomona fluorescens, Pseudomona aeruginosa y Pseudomona maltophilia presentan resistencia al Trimetoprim/sulfametoxazol, la es sensible a todos los antibióticos usados presentando un cierta inmediatez con Trimetopim/sulfametoxazol, el  Chromobacterium spp es resistente a Amoxicilina/ácido clavulánico.

 

Discusión

Es importante tener en cuenta que este tipo de fritura es ampliamente uno de los menos saludables en cuanto a alimentos se refiere ya que el aceite es sometido por varias ocasiones a períodos alternados de calentamiento y enfriamiento, por tanto, deberá prestarse especial atención en favor de encontrar alternativas para su procesamiento. Pese a que algunos microorganismos tienen la capacidad de proliferar a diferentes intervalos de temperatura ( -8° a +90 °C), la temperatura óptima para el desarrollo de casi todos los patógenos es de 35° C (95° F). Es importante tener en cuenta este aspecto en cuanto al manejo y conservación de los alimentos, asociados a las temperaturas a las que deben hacerlo, si bien las muestras se encontraron en temperaturas ambiente, hacen falta estudios que propongan alternativas para evitar la proliferación mayor de baterías.

La sensibilidad a varios antibióticos existentes en algunos microorganismos patógenos, facilita la protección de la salud del consumidor en algunos casos. Entre estos casos están la S. aureus y su sensibilidad a Tetraciclina, Gentamicina y Cloranfenicol; la Salmonella spp al Amoxicilina/ácido clavulánico y el Chromobacterium spp al Amikacina y Gentamicina. Sin embargo, la resistencia de este microorganismo hace totalmente lo contrario. Varios estudios ratifican que la resistencia de microorganismos como el staphylococcus aureus a amoxicilina/ácido clavulánico, desactivan en muchos casos al antibiótico, desarrollando mecanismos más complejos de resistencia frente a este tipo de medicamentos.

 

Conclusiones

En términos generales pudo determinarse que es altamente importante analizar las características físico-químicas de los aceites usados, ya que permiten conocer las condiciones exactas en las que se encuentran los microorganismos al momento de desarrollar resistencia o sensibilidad a algún antibiótico. Los resultados del antibiograma visibilizan que gran parte de las bacterias analizadas son resistentes a ciertos antibióticos, especialmente los del tipo betalactámico como penicilinas, aminoglucósidos y macrólidos. Esto pone de manifiesto la gran problemática que existe actualmente alrededor del consumo de alimentos que pasan por un proceso de fritura. Esta resistencia bacteriana constituye claramente uno de los mayores problemas a nivel mundial y nuestras áreas de estudio no fueron la excepción. La resistencia como tal no se desarrolla únicamente por un proceso natural sino también por mutaciones aleatorias. En este sentido, el problema de salud se ve agravado a que este tipo de enfermedades infecciosas no puede ser controlado fácilmente por las personas aumentando la morbilidad y la mortalidad (Calderón y Aguilar, 2016); papel de la resistencia y sensibilidad de los microorganismos patógenos está directamente relacionado a la reducción de la efectividad terapéutica.

 

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