������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������

 

 

Aplicaci�n de diferentes niveles de pepsina para la obtenci�n de colageno a partir de las patas de pollo

 

Application of different levels of pepsine for collagen obtaining from chicken legs

 

Aplica��o de diferentes n�veis de pepsina para obter col�geno de p�s de frango

 

Linda Mariuxi Flores-Fiallos ^I

linda.flores@espoch.edu.ec

�https://orcid.org/0000-0003-4516-6963

 

Cristina Nataly Villegas-Freire ^II

c.villegas@espoch.edu.ec

https://orcid.org/0000-0003-3392-8051

 

Mar�a Augusta Guadalupe-Alcoser ^III

ma.guadalupe@gmail.com

�https://orcid.org/000-0002-0547-215X

 

Correspondencia: linda.flores@espoch.edu.ec

Ciencias Naturales

Art�culo de investigaci�n

 

��������������������������������������� ���������������������������������������������

*Recibido: 20 de diciembre de 2020 *Aceptado: 12 de enero de 2021 * Publicado: 08 de febrero de 2021

       I.            Master Universitario en Qu�mica Org�nica, Ingeniera Qu�mica, Facultad de Ciencias de la Escuela Superior Polit�cnica de Chimborazo, Riobamba, Ecuador.

    II.            Magister en Formulaci�n, Evaluaci�n y Gerencia de Proyectos para el Desarrollo, Master universitario en Qu�mica, Bioqu�mico Farmac�utico, Facultad de Recursos Naturales de la Escuela Superior Polit�cnica de Chimborazo, Riobamba, Ecuador.

�III.            Magister en Ingenier�a Qu�mica Aplicada, M�ster Universitario en Sistemas Integrados de Gesti�n de la Prevenci�n de Riesgos Laborales, la Calidad, el Medio Ambiente y la Responsabilidad Social Corporativa, Ingeniera Qu�mica, Facultad de Ciencias de la vida de la Universidad Estatal Amaz�nica, Puyo, Ecuador.�

Resumen

Se obtuvo col�geno de las patas de pollo con la aplicaci�n de 2, 4 y 6% de pepsina, con tres repeticiones cada uno, distribuidos bajo un dise�o completamente al azar, los resultados fueron analizados mediante an�lisis de varianza y la separaci�n de medias seg�n Tukey. Estableciendo que el empleo de pepsina afect� estad�sticamente las caracter�sticas f�sico � qu�micos y microbiol�gicos del col�geno de las patas de pollo. Mostr�ndose que al aplicar el 6 % de pepsina, reportaron las mejores respuestas en nitr�geno total (13 %), mayor porcentaje de prote�na (78%), densidad (0,37g/mL), una conductividad (20,48ms/cm) y menor cantidad de aerobios (42 UFC/g). En cuanto a la variable pH (5,28) del col�geno existi� diferencias estad�sticas pero esta disminuy� a medida que se increment� los niveles de pepsina. Por lo que se recomienda utilizar el 6% de pepsina en la obtenci�n de col�geno de las patas de pollo; ya que present� las mejores caracter�sticas f�sico� qu�micos y microbiol�gicos.

Palabras claves: Extracci�n; pepsina; col�geno; conductividad.

 

Abstract

Collagen was obtained from the chicken legs with an application of 2%, 4% and 6% of Pepsin, with 3 repetitions each one, distributed under a completely random design. Analysis of variance and the division of means according to Tukey considered the results. Stating that the use of pepsin affects statistically the physical-chemical and microbiological characteristic of collagen from the chicken legs. It is shown that when applying 6% of pepsin, the best responses were reported in total nitrogen (13%), higher percentage of protein (78%), density (0.37g/mL), conductivity (20.48mS/cm), and less amount of aerobic (42 UFC/g). As for the variable pH (5.28) of collagen, there are statistical differences, but this decreased as the pepsin levels increased. There fore it is recommended to use 6% of the pepsin in obtaining collagen from the chicken legs, since the best physical-chemical and microbiological characteristic were presented.

Keywords: Extraction; Pepsin; Collagen; Conductivity.

 

Resumo

O col�geno foi obtido das patas de frango com a aplica��o de pepsina a 2, 4 e 6%, com tr�s repeti��es cada, distribu�das em um delineamento inteiramente casualizado, os resultados foram analisados ​​por an�lise de vari�ncia e separa��o das m�dias segundo Tukey. Estabelecer que o uso de pepsina afetou estatisticamente as caracter�sticas f�sico-qu�micas e microbiol�gicas do col�geno dos p�s de frango. Mostrando que ao aplicar 6% de pepsina, eles relataram as melhores respostas em nitrog�nio total (13%), maior porcentagem de prote�na (78%), densidade (0,37g / mL), condutividade (20,48ms / cm) e menor quantidade de aer�bios (42 CFU / g). Em rela��o � vari�vel pH (5,28) do col�geno, houve diferen�a estat�stica, mas esta diminuiu com o aumento dos n�veis de pepsina. Portanto, � recomendado o uso de pepsina a 6% na obten��o de col�geno dos p�s de frango; por apresentar as melhores caracter�sticas f�sico-qu�micas e microbiol�gicas.

Palavras-chave:Extra��o; pepsina; col�geno; condutividade..

 

Introducci�n

Los mataderos av�colas generan efluentes l�quidos, compuestos de grasas, prote�nas y restos de animales. Tambi�n generan los desechos s�lidos, tales como: los huesos, las entra�as, patas, cabezas, piel. Los cuales usualmente al no poder ser utilizados son desechados en los vertederos, debido a que por sus caracter�sticas organol�pticas no son aptas para el consumo humano directo. La producci�n de carne de pollo, genera una gran cantidad de subproductos los cuales en su mayor�a poseen una alta fuente de prote�na, es as� que a partir de las crestas se puede extraer col�geno de tipo I en una proporci�n del 1 al 1.6% (Castro, D. 2016).

El col�geno es una prote�na fibrosa insoluble en agua, formada por un conjunto de tres cadenas polipept�dicas las cuales son las responsables de su resistencia es el principal componente fibroso de huesos, dientes, tejido conectivo (cart�lago, tendones).� Esta prote�na posee numerosas aplicaciones principalmente en la industria farmac�utica y alimenticia debido a sus propiedades f�sico-qu�micas, ya que puede ser usado como agente emulsificante, estabilizante, gelificante. Es una de las prote�nas m�s abundantes en los organismos Heter�trofos. Son m�s f�ciles de aislar mientras m�s joven sea el animal ya que al ser m�s viejo la carne tiende a ser m�s dura y con poca flexibilidad. Cuando se hierve el col�geno en agua se convierte en la prote�na Hidrosoluble conocida com�nmente como �Gelatina�, que la cual al enfriarse al ambiente esta se cuaja formando as� un gel.

La pepsina es una enzima presente de forma natural en el organismo, y de forma particular en el jugo g�strico. La pepsina ayuda en la digesti�n de los alimentos degradando las prote�nas que llegan al est�mago. Es producida y secretada por la mucosa g�strica en el momento de la digesti�n. La pepsina tambi�n puede ser comercializada. En este caso proviene del est�mago del cerdo. La pepsina forma parte de la composici�n de numerosos quesos y de ciertas sodas (Figueroa, C. et al. 2016).

Act�a principalmente sobre enlaces pept�dicos de naturaleza hidr�foba, preferentemente arom�ticos. La pepsina es m�s activa con un pH de entre 2 y 3. Se desactiva permanentemente con un pH superior a 6. Es segregada por las c�lulas de las paredes del est�mago. Se libera en forma de pepsin�geno. Digesti�n de los telop�ptidos. La digesti�n de los telop�ptidos se hace con pepsina. Al eliminar los telop�ptidos, el col�geno resulta menos ant�geno, m�s puro y con mejores posibilidades para ser utilizado como biomaterial (Figueroa, C. et al. 2016).

Los estudios sobre fuentes alternativas y nuevas funcionalidades de col�geno ha experimentado un gran auge, en parte debido al creciente inter�s en la valoraci�n los subproductos industriales (desde la industria de la carne y el 15 pescado). Debido a esto, hoy en d�a tambi�n se obtiene col�geno a partir de patas de pollo siendo �ste un sustituto de col�geno procedente de manera convencional a partir de algunos mam�feros.

Con la extracci�n selectiva de este tipo de prote�nas es posible generar valor agregado a la cadena productiva a partir de los desechos av�colas, adem�s que, la cantidad de residuos en el ambiente ser� significativa.

Por lo anotado, en la presente investigaci�n se plante� el siguiente objetivo:

�         Evaluar los diferentes niveles de col�geno obtenidos a partir de las patas de pollo

 

Materiales y M�todos

En la presente investigaci�n se utiliz� 10.000 g de patas de pollo y niveles de 2, 4 y 6 % de pepsina y un tratamiento control, con 500 g de materia prima para cada tratamiento y 5 repeticiones por tratamiento.

Se evalu� distintos niveles de pepsina para la extracci�n de col�geno, con niveles de 2, 4, y 6% de pepsina. Estos tratamientos fueron distribuidos en un Dise�o Completamente a Azar (DCA), con cuatro tratamientos (incluido el control) y 5 repeticiones por tratamientos, teniendo as� un total de 20 unidades experimentales.

La extracci�n de col�geno se hizo en base al siguiente procedimiento: Las patas se lavaron en agua potable, se adicion� una soluci�n de hipoclorito de sodio a 5 % durante una hora y se enjuag� con agua destilada. La piel y los tendones se separaron de los huesos con ayuda de un bistur�, luego se realiz� la eliminaci�n de las grasas y pigmentos mediante una agitaci�n constante en etanol al 20% durante 24 horas. Se centrifug� la muestra de 500mL cada muestra por 20 minutos y se desech� el sobrenadante, en el cual se encontraba todas las grasas presentes en el tejido tratado.�����������

Se elimin� la prote�na ajena al col�geno mediante agitaci�n constante con NaOH 0.2 N por un tiempo de 24 h, para luego centrifugar nuevamente por 20 minutos y despu�s se desech� el sobrenadante. Luego se agreg� la pepsina (sigma- Aldrich) al 2% y 500mL de �cido ac�tico 0.5 M al precipitado. La mescla se someti� a un reposo de 36 horas para luego centrifugar por 40 minutos. El sobrenadante se ajust� a un pH de 7.0 mediante NaOH 1 N y se mantuvo en agitaci�n durante 24 h, se ajust� nuevamente el pH a 3.5 con �cido ac�tico 0.5 M. luego se a�adi� NaCl al 0,9M lentamente para precipitar la prote�na, esta mescla se centrifug� durante 40 minutos, el precipitado resultante de disolvi� en �cido ac�tico 0.5 M. Como �ltimo se realiz� la liofilizaci�n en un liofiliador Marca a una temperatura de -54�C durante 48 horas.

 

Figura 1: Diagrama de flujo para la obtenci�n de Col�geno

Fuente: Autor

 

 

Resultados y discusi�n

Se determin� el nitr�geno total mediante el m�todo de kjeldahl seg�n AOAC, 2001.11. La concentraci�n de nitr�geno se multiplic� por el factor de prote�na (6,25) para obtener el porcentaje de prote�na presente en la muestra. Para lo cual se pes� la 1g muestra en una balanza anal�tica y se coloc� en un bal�n de kjeldahl, se agreg� 10g de catalizador (mescla de sulfato de cobre y sulfato de sodio) y 25 mL de H2SO4. Luego se coloc� en el digestor y se esper� hasta que se elimine todo el humo, hasta que la disoluci�n se aclare y se continu� la ebullici�n durante al menos otros 30 min. Se enfri� el bal�n y se coloc� 200mL de agua, 100 ml de NaOH al 50% y unos gr�nulos de Zn para estabilizar la reacci�n. Luego se coloc� en el �rea de destilaci�n. En un Erlenmeyer se puso 100ml de H3BO3 al 2.5% y se coloc� debajo del �rea mencionada. Introduciendo la punta del tubo del destilado en el Erlenmeyer.

Enseguida se coloc� el bal�n en el �rea de destilaci�n. Se esper� hasta en el Erlenmeyer la soluci�n llegue a 300ml de destilado. Se Retirar del equipo y se coloc� el indicador Verde Rojo de Bromo cresol lo que hizo cambiar de coloraci�n a verde menta. Luego se titul� con HCl al 0.1 N. Se tomaron datos para luego ser transformado a trav�s de un factor en prote�na utilizando las siguientes ecuaciones:

Donde:

V: Titulaci�n le�da de HCL 0,1 N

m: Masa de la muestra en gramos

N: 0,1 N HCl

Factor: 6.25

 

La densidad se determin� mediante el m�todo gravim�trico tomado de Farmacopea, ISO 787/11, ASTM B527. Donde se midi� la densidad del col�geno en polvo. Se determin� la temperatura y la humedad relativa del laboratorio. Encontrando una temperatura de 18�C y una humedad relativa de 45%. Primero se pes� la probeta vac�a, despu�s se pes� la probeta m�s el col�geno y por �ltimo se pes� la probeta m�s agua, con los datos obtenidos se procedi� a aplicar la siguiente ecuaci�n para hallar la densidad de la muestra:

 

 

Se determin� el potencial de Hidr�geno (pH) de las muestras de col�geno mediante el m�todo potenci�metro NTE INEN 1519 - 1987. Se utiliz� un pHmetro marca el cual se calibro con dos soluciones Buffer con pH 7 y 4 se realiz� la verificaci�n con el Buffer de pH 7, luego se disolvi� 10g de muestra en 50 mL de agua destilada mediante agitaci�n 30 min y se coloc� en un vaso de precipitaci�n de 100mL se dej� decantar durante 30 min, se sumergi� el electrodo en la muestra hasta que se estabilice el equipo, y se procedi� a tomar la lectura.

Los resultados de la valoraci�n f�sico qu�mica del col�geno obtenido con los diferentes niveles de pepsina, se reporta en la Tabla 1, donde se aprecia que existe variaci�n por el efecto de la pepsina.

 

Tabla 2: An�lisis f�sico-qu�mico y microbiol�gico de col�geno de patas de pollo obtenidos con diferentes niveles de pepsina

Fuente: Autor

 

E.E: Error est�ndar; Prob.>0,05: No existen diferencias estad�sticas; Prob.<0,05: Existen diferencias estad�sticas; Medidas con letras distintas en una fila difieren estad�sticamente seg�n prueba Tukey.

Los contenidos de nitr�geno total del col�geno presentaron diferencias significativas (P<0,05), por el efecto de los niveles de pepsina adicionadas, por cuanto los mayores contenidos se encontraron al adicionar 4 y 6% de pepsina que presentaron 13% de nitr�geno total, en cambio al utilizar el 2% de pepsina y el grupo control redujeron su contenido de nitr�geno al 10 y 11%.

Por lo que mediante el an�lisis de la regresi�n se estableci� una tendencia cuadr�tica significativa como se muestra en la Figura 2, que indica que el porcentaje de nitr�geno total aumenta, pero no de forma proporcional a medida que se incrementa los niveles de pepsina. Siendo similar con lo que reporta Almeida, P. et al (2013), quien afirma que se obtuvo el 13,5% de nitr�geno total, valor que es similar al valor encontrado en este estudio.

 

Figura 2: Comportamiento de Nitr�geno total (%) del col�geno obtenido de las patas de pollo

Fuente: Autor

 

Los contenidos de prote�na del col�geno presentaron diferencias significativas (P<0,05), por efecto de los niveles de pepsina aplicadas, por cuanto los mayores contenidos de encontraron al aplicar 4 y 6% de pepsina que presentaron el 78% de prote�na, mientras que al utilizar los niveles de 2% y el grupo control redujeron su contenido proteico a 67 y 62%, respectivamente, por lo que mediante el an�lisis de la regresi�n se estableci� una tendencia cuadr�tica significativa Figura 3, que determina el contenido proteico del col�geno aumenta pero no de forma proporcional.

 

Figura 3: Comportamiento del contenido de prote�na (%) del col�geno obtenido de las patas de pollo con distintos niveles de pepsina

Fuente: Autor

 

Al aplicarse los distintos niveles de pepsina en la extracci�n de col�geno se determin� que hubo diferencias significativas (P>0,05), ya que presentaron valores de 6,10, al aplicar 6%, 5,99, con el 4% de pepsina, 5,75 con 2% y 5,28 en el tratamiento control, por lo que mediante el an�lisis de la regresi�n se estableci� una tendencia cuadr�tica significativa Figura 4, que establece que a medida que se incrementa los niveles de pepsina tiende a disminuir el pH.

 

Figura 3: Comportamiento pH del col�geno obtenido de las patas de pollo con distintos niveles de pepsina

Fuente: Autor

 

La densidad frente a los distintos niveles de pepsina mostraron diferencias estad�sticas (P<0,05), ya que al aplicar 4 y 6% de pepsina la densidad del col�geno fue de 0,35 y 0,37g/ml en su orden, mientras que con el tratamiento control y 2% de pepsina se encontraron valores inferiores y que fueron de 0,26 y 0,33g/ml (en su orden); por lo que mediante el an�lisis de la regresi�n se estableci� una tendencia cuadr�tica significativa observada en la figura 4, que determina que a medida que se incrementa los niveles de pepsina la densidad tiende a incrementarse pero no de forma proporcional, esto posiblemente se deba a que el porcentaje de pepsina a�adida no era suficiente para desdoblar la prote�na de col�geno haciendo que sea m�s densa la relaci�n al tratamiento control. La densidad del col�geno es de 0,906 g/ml, lo que quiere decir que es soluble en agua (Castenblanque, E. 2015)

 

Figura 4: Comportamiento del contenido de densidad (g/ml) obtenido de las patas de pollo con distintos niveles de pepsina

Fuente: Autor

La conductividad frente a los distintos niveles de pepsina present� valores con diferencias significativas (P<0,05) por cuanto los mayores contenidos se encontraron al aplicar el 6% de pepsina que report� un valor de 20,48 mS/cm, mientras que al aplicar el grupo control present� una conductividad menor de 16,55 mS/cm; por lo que, el an�lisis de la regresi�n estableci� una tendencia cuadr�tica significativa tal como lo muestra la Figura 5, que indica que a medida que se incrementa los niveles de pepsina la conductividad aumenta gracias a la acci�n de la pepsina la cual degrada los enlaces pept�dicos y permite la presencia de s�lidos totales disueltos en el col�geno.

Los contenidos encontrados de conductividad no deben ser superior a 500 �S/cm (Torres, J. 2012), las patas de pollo poseen peque�as cantidades de minerales y sales, lo que quiere decir que la conductividad del col�geno extra�do es alto debido a la presencia de sales y minerales en las patas de pollo, ya que es org�nico y por ende es deficiente para conducir electricidad por naturaleza.

 

Figura 5: Comportamiento de conductividad (mS/cm) obtenido de las patas de pollo con distintos niveles de pepsina

Fuente: Autor

 

En el col�geno de las patas de pollo la presencia de aerobios totales (UFC/g) fue de 22� 43 UFC/g en el obtenido con el grupo de control, 40� 89 UFC/g con el 2% de pepsina y 42�88 UFC/g al emplearse los niveles 4 y 6% de pepsina, not�ndose que a mayores cantidades de pepsina existe una mayor presencia de aerobios totales; aunque la presencia de estos microorganismos se deba a la contaminaci�n ambiental, por cuanto para la obtenci�n de col�geno que utiliz� el proceso de liofilizaci�n a una temperatura de -540C en el cual deber�a haberse eliminado todo tipo de microorganismos.

Debido a su crecimiento lento y su baja competitividad los aerobios totales se manifiestan en condiciones no favorables, por consiguiente, debido a su baja presencia en el col�geno obtenido es apto para el consumo e industrializaci�n sin afectar la salud de los consumidores.

Para obtener col�geno de patas de pollo con niveles 2, 4 y 6% de pepsina se utiliz� 500 g en cada tratamiento, despu�s de obtener el col�geno se liofiliz� y se obtuvo el rendimiento aplicando la siguiente ecuaci�n, donde los resultados se reflejan en la tabla 2.

 

 

 

Tabla 2: Rendimiento de col�geno al aplicarse los distintos niveles de pepsina

Fuente: Autor

 

Obteniendo como el mejor tratamiento en rendimiento con el 6% de pepsina en la extracci�n de col�geno en las patas de pollo, donde se obtuvo un rendimiento del 62% equivalente a 310 g de col�geno enrelaci�n a los 500 g de masa de piel y tendones de las patas de pollo.

 

Conclusiones

�         Los niveles de pepsina en la extracci�n de col�geno afectaron estad�sticamnete su composici�n f�sico-qu�mica.

�         Al utilizarse el 6% de pepsina, el col�geno present� mejores respuestas en nitr�geno (13), prote�na (78%), densidad (0,37g/mL) y conductividad (20,48 �s/cm).

�         Los resultados microbiol�gicos demostraron que a mayor cantidad de pepsina m�s alta es la presencia de aerobios totales, por cuanto en el col�gno del grupo control fue de 22�43 UFC/g y se elev� a 42�88/g con la utilizaci�n del 6% de pepsina.

�         Con el ejemplo de 6% de pepsina en la extracci�n de col�geno en las patas de pollo, se obtuvo los mejores rendimientos (62%).

 

Referencias

1.             Almeida, P. Alves, W., Farias, T. & Curvelo, J. 2012. Elaboraci�n y clasificaci�n sensorial de gelatinas de patas de pollos. Correlaci�n usando redes neuronales artificiales. 130 - 134. Disponible en: �https://www.researchgate.net/publication/262462953_elaboracion_y_clasificacion_sensorial_de_gelatinas_de_patas_de_pollos_correlacion_usando_redes_neuronales_artificiales.

2.             Almeida, P. Silva, J. Lannes, C. & Farias, T. 2013. Quality assurance and economical feasibility of an innovative product obtained from a byproduct of the meat industry in Brazil. Business Managemenet, p�gs. 2745-2756.

3.             Disponible en: http://www.academicjournals.org/journal/AJBM/article-fulltext-pdf/85954E139414.

4.             Arag�n, M. 2011. Biomateriales. Disponible en �https://es.scribd.com/doc/64642318/fuentes-del-colageno-y-sus-metodosde-extraccion

5.             Basurto, C. & Grijalva, E. 2015. Escuela Polit�cnica Agropecuaria de Manab� Manuel F�lix L�pez- Tesis- Incidencia De Col�geno De Pollo Y Temperatura Del Proceso En La Calidad Proteica De Salchicha Escaldada. Calceta-Manab�. Disponible en: http://repositorio.espam.edu.ec/bitstream/42000/442/1/TAI97.pdf. BEN�TEZ, R. IBARZ, A. & PAGAN, J. 2010. Hidrolizados de prote�na: procesos y aplicaciones. Popay�n � Colombia.: Grupo de Qu�mica de Productos Naturales, Departamento de Qu�mica, Universidad del Cauca. Disponible en: http://www.scielo.org.ar/pdf/abcl/v42n2/v42n2a08.pdf.

6.             Castelblanque, E. (2015). Desarrollo del diagrama de estado del Gel Col�geno para impresi�n de alimentos en 3D. Valencia. Obtenido de Disponible en: https://riunet.upv.es/bitstream/handle/10251/54286/TFGEvaCastelblanque_14363445500244268693290021222438.pdf?sequence=6&isAllowed=y.

7.             Castro, D. 2016. Obtenci�n de Col�geno de Crestas de Pollo. Obtenido de Proyecto de Grado. Disponible en: �http://repositorio.uis.edu.co/jspui/ bitstream/123456789/478/2/145358.pdf

8.             Certad, M. & P�rez, B. 2007. Caracter�sticas de la Gelatina de Patas de Pollo Obtenida por un Proceso �cido. 322-328. CORREA, M. & LOPES, C. 2013. Gelation property and water holding capacity of heat-treated collagen at different temperature and pH values. Food Research, 213-223. Disponible en: http://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0963996912004279?via% 3Dihub

9.             G�mez, L. Pi�a, B. & Rodr�guez, F. 2011. Instituto de Investigaciones en Materiales, Universidad Nacional Aut�noma de M�xico. Obtenci�n y caracterizaci�n de col�gena tipo I a partir de tend�n bovino. M�xico. Disponible en: http://www.scielo.org.mx/pdf/sv/v24n4/v24n4a6.pdf

10.         L�pez, M. Amaral, R. & Kalil, S. 2008. Proteolisis enzim�tica del col�geno dentinario. Consicientiae Sa�de, 477-486. Disponible en: http://www.scielo.edu.uy/pdf/ode/v12n14/v12n14a04.pdf.

11.         Peralta, C. Rivera, N. & Gualdr�n, L. 2012. Extracci�n de col�geno en medio �cido-b�sico a partir de los cascos de bovinos. Epsil�n, 59-69. Disponible en: https://revistas.lasalle.edu.co/index.php/ep/article/view/2203/2027

12.         Serrano, J. 2011. Estandarizaci�n de un proceso de extracci�n de col�geno a partir de los residuos de fileteo de tilapia (Oreochromis sp) y cachama (Piaractus brachypomus). Bogot�. Disponible en: http://www.bdigital.unal.edu.co/4880/1/jenifercarolinaserranogaona.2011 .pdf

 

 

 

 

 

� 2020 por los autores. Este art�culo es de acceso abierto y distribuido seg�n los t�rminos y condiciones de la licencia Creative Commons Atribuci�n-NoComercial-CompartirIgual 4.0 Internacional (CC BY-NC-SA 4.0)

(https://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/4.0/).