Ciencias de la salud

 

Artículo de revisión

                                                                                 

 

Determinación de Microorganismos en Ambiente del Área de Neonatología de un Hospital ubicado al Sur del Ecuador

 

Determination of Microorganisms in the Neonatology Area of a Hospital located in the South of Ecuador

 

Determinação de microrganismos na área de neonatologia de um hospital localizado no sul do Equador

 

 

Cristhian D. Cabrera-Gia ^I
cdcabrera_est@utmachala.edu.ec

Carmen E. Silverio-Calderón ^II
csilverio@utmachala.edu.ec

 

 

Correspondencia: cdcabrera_est@utmachala.edu.ec

 

 

 

          ^I.            Bioquímico Farmacéutico; Universidad Técnica de Machala; Machala, Ecuador.

        ^II.            Bioquímico Farmacéutico; Magister en Biotecnología Molecular; Universidad Técnica de Machala; Machala, Ecuador.

 

 

 

 

 

Resumen

El presente estudio de tipo descriptivo, cumple con el objetivo de identificar la presencia de microorganismos en el ambiente del área de neonatología de un Hospital ubicado al sur del Ecuador, mediante un estudio microbiológico para mejorar el control de las medidas de asepsia. Se aplicó el método de muestreo mediante la técnica de sedimentación en placas de agar para la toma de muestra ambiental, el método de aislamiento permitió clasificar las bacterias, para la tipificación bacteriana se empleó la tinción de Gram, se aplicó el método McFarland, se aplicaron pruebas bioquímicas y enzimáticas. De los 14 muestreos realizados, se destaca S. epidermidis en un 80%, S. saprophyticus 12%, E. coli en un 4% y Serratia marcescens 4%. Además, se identificó a la unidad de cuidados básicos como la sala de mayor continuidad de colonias en un 52%. Al comparar los resultados obtenidos en las unidades de estudio con la Norma UNE‐EN‐ISO 14698‐1/2:2006 se clasificó como ambientes muy limpios, sin evidenciar riesgo para la salud de los recién nacidos.

Palabras claves: Infección Nosocomial; Microorganismos; Calidad Microbiológica Ambiental; Bioseguridad, Recién Nacidos.

Abstract

This descriptive study fulfills the objective of identifying the presence of microorganisms in the environment of the neonatology area of a Hospital located in southern Ecuador, through a microbiological study to improve the control of aseptic measures. The sampling method was applied by means of the sedimentation technique in agar plates for the environmental sampling, the isolation method allowed to classify the bacteria, for the bacterial typing the Gram stain was used, the McFarland method was applied, biochemical and enzymatic tests. Of the 14 samples taken, S. epidermidis stands out in 80%, S. saprophyticus 12%, E. coli in 4% and Serratia marcescens 4%. In addition, the basic care unit was identified as the room with the greatest continuity of colonies in 52%. When comparing the results obtained in the study units with the UNE-EN-ISO 14698-1 / 2: 2006 Standard, it was classified as very clean environments, without evidencing a risk to the health of newborns

Keys words: Nosocomial infection; Microorganisms; Environmental Microbiological Quality; Biosecurity, Newborns.

Resumo.

Este estudo descritivo atende ao objetivo de identificar a presença de microrganismos no ambiente da área de neonatologia de um hospital localizado no sul do Equador, por meio de um estudo microbiológico para melhorar o controle de medidas assépticas. O método de amostragem foi aplicado por meio da técnica de sedimentação em placas de ágar para amostragem ambiental, o método de isolamento permitiu classificar as bactérias, para a tipagem bacteriana foi utilizada a coloração de Gram, aplicado o método de McFarland, testes bioquímicos e enzimáticos. Das 14 amostras coletadas, S. epidermidis se destaca em 80%, S. saprophyticus 12%, E. coli em 4% e Serratia marcescens 4%. Além disso, a unidade básica foi identificada como a sala com maior continuidade de colônias em 52%. Ao comparar os resultados obtidos nas unidades de estudo com a norma UNE-EN-ISO 14698-1 / 2: 2006, classificou-se como ambientes muito limpos, sem evidenciar um risco para a saúde dos recém-nascidos.

Palavras chaves: Infecção nosocomial; Microorganismos; Qualidade Microbiológica Ambiental; Biossegurança, recém-nascidos.

Introducción.

Los primeros hospitales destinados a brindar vigilancia y auxilio a los enfermos se los denominó “Xenodoquios”, fueron fundados por obispos en el siglo IV d.C. que tenían a su cargo a todos los pobres, huérfanos, mujeres desamparadas y peregrinos de la comunidad. La ayuda era abierta para todo aquel que lo necesite incluidos enfermos mentales y leprosos. Para el siglo VIII los dispensarios médicos se encontraban completamente especializados y contaban con una infraestructura adecuada.

Hacia el siglo XIII la iglesia dejó de estar a cargo de los hospitales, y pasó a estar a mano de los políticos de esa época, por consiguiente toda la comodidad que existía se perdió convirtiéndose en lugares indecorosos y desagradables, donde las personas ya no percibían una esperanza de vida sino un lugar para morir por la falta de atención y malas prácticas de asepsia por parte del personal encargado. (1)

El ambiente hospitalario puede llegar a hacer un reservorio y fuente de contaminación para pacientes ambulatorios, hospitalizados y sobre todo recién nacidos   cuando no se consideran los protocolos de desinfección para la prevención de infecciones intrahospitalarias originadas por microorganismos patógenos. (2)

Hoy en día la presencia excesiva microorganismos patógenos en los hospitales según el área de pacientes inmunocomprometidos son causantes de un sinnúmero de defunciones en la fase neonatal a nivel mundial, actualmente mueren entre 2 y 5 millones de neonatos en sus primeros días de nacidos, aproximadamente 8000 recién nacidos al día, lo que trae consigo un mayor gasto social y económico para las entidades de salud.

Las infecciones nosocomiales son las inoculaciones adquiridas por personas que ingresan a un dispensario de salud sea pública o privada que tienden a desarrollarse durante las 48 a 72 horas de su entrada o unos 25 a 30 días antes del alta clínica. Las contaminaciones por microorganismos patógenos más importantes son las infecciones urinarias, gastrointestinales, virales, bacterianas, respiratorias, quirúrgicas y neonatales. (3) (4)

En Ecuador la tasa de mortalidad por infecciones nosocomiales (neumonía nosocomial y bacteriemia) es sumamente alta, aproximadamente 1000 hospitalizados fallecen por esta razón, a diferencia que en otros países como Brasil o Perú, pero su incidencia y lugar de mayor prolongación (cuidados intensivos) de contaminaciones es semejante.

Los recién nacidos están expuestos a muchas enfermedades comparado con niños de 9 años o adultos de 25 años de edad, esto se debe a que el sistema inmunitario de los recién nacidos no se encuentra desarrollado ni preparado para combatir ninguna clase de infección. (5) (6)

El estudio microbiológico del ambiente en las diferentes áreas de los hospitales es de vital importancia para tener un control de la presencia o ausencia de agentes etiológicos en las superficies y así reducir los índices de contaminación por gérmenes patógenos que se transportan mediante el aire, flotando sobre moléculas inertes, como: gotas, polvo, partículas etc. (7) (8)

El presente estudio tuvo como objetivo determinar la presencia de microorganismos patógenos en el ambiente del Área de Neonatología de un Hospital ubicado al Sur del Ecuador, mediante un estudio microbiológico para el mejoramiento en el control de las medidas de asepsia. (9)

Metodología.

En la presente investigación se empleó el Método de Inoculación, Mediante la técnica de sedimentación en placa, Método de Aislamiento, Método Gravimétrico, Método Volumétrico, Método McFarland: Permite obtener una concentración homogénea. (10)

Se efectuaron diversas pruebas bioquímicas de identificación, pruebas enzimáticas, de vital importancia para el aislamiento, y caracterización de las bacterias. Para Stafilococcus se realizó: Prueba catalasa, coagulase, oxidasa, fermentación de manitol y susceptibilidad a la novobiocina. Para Enterobacterias se realizó: Prueba de citrato, prueba de ureasa, prueba lisina hierro, prueba hierro triple azúcar, prueba de Indol y motilidad. (11) (12) (13)

Materiales.

Se usó autoclave para la esterilización de los materiales de laboratorio y medios de cultivo. Se usó cajas petri con medios de cultivos estériles para la toma de muestra, aislamiento de las colonias, para realizar pruebas de susceptibilidad y para identificación de microorganismos. Una incubadora para el desarrollo y almacenamiento de colonias bacterianas a una temperatura de 37^oC. Se empleó un microscopio para la observación de preparación en fresco y tinción de Gram. Para evitar contaminación se trabajó en la cámara de flujo laminar. Se utilizó una balanza analítica, cocineta, contador de colonias, centrifuga y equipo de baño maría. (14)

Sustancias y reactivos.

Agua destilada, agua oxigenada, solución salina, alcohol etílico, medios de cultivo estériles (Agar Sangre, Agar Macconkey, Agar Mueller Hinton y Agar Manitol Salado), reactivos para tinción de Gram y Discos de Novobiocina 5 mg.

Toma de muestra ambiental.

El muestreo ambiental se realizó dos veces al mes, en horarios de 12:30 p.m. a 13:30 p.m. a las diferentes unidades del Área de Neonatología del Hospital.
Para la toma de muestra, se utilizó cajas petri con medio de cultivo estéril (agar sangre), que fueron colocadas abiertas de 20 a 40 minutos en los diferentes puntos de muestreo (Técnica sedimentación en placa), luego se cerraron las cajas y rápidamente fueron retiradas por el encargado correspondiente y llevadas al laboratorio de Microbiología en una caja transportadora totalmente estéril. (15) (16)

Procesamiento de la muestra ambiental.

Posteriormente a la recolección de las muestras, se procede a incubar a 35°C hasta 24 horas, se efectuó la lectura y al evidenciar presencia de colonias bacterianas inmediatamente se realizó un aislamiento en medio de cultivo agar sangre y agar Macconkey de las colonias, se incubó al mismo tiempo y temperatura. Según el desarrollo bacteriano de las colonias en los medios de cultivo se realizó una preparación en fresco y tinción de Gram, seguido de las pruebas bioquímicas de identificación para Staphylococcus spp. y para Enterobacterias. (15) (17)

Las muestras ambientales (cajas petri) fueron procesadas en el área de bacteriología según el Protocolo de Toma de Muestra de Ambiente, establecido por el Hospital en estudio. 

Resultados y Discusión.

 

Tabla 1. Género y/o especies bacterianas aisladas en el Área de Neonatología.

 

Tabla 2. Microorganismos identificados según las diferentes unidades del Área de Neonatología.

Los microorganismos identificados en el presente estudio fueron 25 colonias bacterianas, donde los agentes que presentaron índice de mayor frecuencia fueron Staphylococcus epidermidis (20 colonias), S. saprophyticus (3 colonias), E. coli (1 colonia), y Serratia marcescens (1 colonia), siendo estos diferentes a los aislados por Zaragoza, Duany Lourdes, García Heladia, Martínez Ángeles, Peregrino Leoncio y Estuardo Salgado. Igual que, en otros estudios los microorganismos identificados mantuvieron estrecha relación entre sí con la temperatura y el ambiente que nos rodea, y logran reproducirse de manera rápida cuando existen temperaturas altas. (7) (18)

El sitio identificado con la unidad de mayor continuidad de agentes bacterianos fue la Unidad de Cuidados Básicos por identificarse 11 colonias bacterianas, seguido del area de Aislamiento de Neonatos con 9 colonias bacterianas y la Unidad de Cuidados Intensivos con 5 colonias bacterianas; los microorganismos aislados discrepan con los resultados obtenidos por los autores antes en mención.

En Valencia-España, según información reportada por Zaragoza et al. (6) el microorganismos predominante en la sala de cuidados intensivos fue P. aeruginosa seguido por E. Coli, como principales causantes de contaminaciones intrahospitalarias, estos resultados coinciden con la bacteria E. coli aislada en el presente estudio, pero difiere en su incidencia.

Duany Lourdes et al. (2005) (19) , reportaron mediante un estudio descriptivo la incidencia de infecciones intrahospitalarias con un índice de 3,2 infantes por cada 100 egresados, identificando a la neumonía como la infección con mayor periodicidad, y a la P. aeruginosa con 27,3% como el agente infeccioso con mayor frecuencia, seguido del Estafilococo coagulasa negativo con 12,3%, y se identificó como consecuencia principal a la canalización venosa seguido del mal uso de los antibióticos que a diferencia del presente estudio efectuado en un Hospital ubicado al Sur del Ecuador no se identificó  factores de riesgo intrínseco y extrínseco, pero el estudio de Danny Lourdes se asemeja con el estudio ejecutado por Zaragoza indicando a la P. aeruginosa como el principal agente patógeno causante de infecciones intrahospitalarias a nivel neonatal.

Un estudio descriptivo prospectivo realizado por García Heladia, Martínez Ángeles y Peregrino Leoncio (2014) (20), reportaron 113 neonatos con infecciones intrahospitalarias, donde su tasa de incidencia fue de 37,7 de 100 neonatos ingresados y la infección nosocomial con mayor frecuencia es la bacteriemia en un 35,5% seguido de la sepsis con un 28,8%, presentándose el Staphylococcus coagulasa negativa (43.4) y la Klebsiella pneumoniae (21%) como los microorganismos patógenos con mayor prevalencia. (21)

Un estudio microbiológico realizado por Estuardo Salgado en Quito en Marzo del 2017, identificó a la Pseudomona aeruginosa y Acinetobacter baumanni como los principales agentes patógenos causantes de infecciones intrahospitalarias y se estima aproximadamente 20 neumonías nosocomiales por cada 1000 días.

En Ecuador según datos de la Comunidad Científica Internacional de Control de Infecciones Nosocomiales mencionan que nuestro país está por arriba del 50%  por poseer mayor índice de mortalidad por contaminaciones hospitalarias siendo la causa principal la neumonía y el mal uso de antibióticos, de los 43 países confederados.

De acuerdo con el estudio microbiológico realizado, los resultados manifestaron que los gérmenes identificados en las diferentes unidades del área de neonatología, no presumen riesgo para la salud de los recién nacidos ni para el personal que labora en las diferentes unidades, debido a que los recuentos bacterianos se encuentran dentro del rango permisible según la norma UNE‐EN‐ISO 14698‐1/2:2006 considerando como AMBIENTE MUY LIMPIO, cuando el recuento microbiológico es de <10 UFC/m3 en salas de Neonatología y Quirófano, sin embargo es de vital importancia cumplir los protocolos de asepsia correctamente para restringir posibles indisposiciones en la salud.

Conclusión.
Se determinó mediante el estudio microbiológico que la presencia de microorganismos en ambiente del área de neonatología de un Hospital ubicado al Sur del Ecuador fue de <5 Unidades Formadores de Colonias por cada muestra positiva analizada y se identificó al S. epidermidis como el agente con mayor frecuencia por ostentarse por 4 ocasiones y se identificó a la Unidad de Cuidados Básicos como la unidad con mayor continuidad de colonias por presentar un crecimiento de 11 colonias bacterianas; concluyendo que la presencia de microorganismos en el Hospital estudiado fue mínima.

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