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La anatomía del primer premolar superior representa un desafío cuando se realiza un tratamiento endodóntico, el entendimiento de su anatomía es fundamental para alanzar el éxito del mismo. Por lo cual, El objetivo del presente estudio fue establecer la anatomía interna del primer premolar superior mediante el proceso de diafanización. La metodología es descriptiva, in vitro, exploratoria para analizar la anatomía interna de 80 primeros premolares superiores usando la técnica de diafanización aplicando el protocolo de Robertson y mediante la colocación de tinta china para observar su estructura. Obteniendo como resultado que el tipo de anatomía interna de las piezas objeto de estudio fue de dos conductos radiculares representados por el 65% pertenecientes a seis tipos de conducto según Vertucci, siendo los más significativos el tipo IV con un 37%, los del tipo II con un 24%, con una forma predominantemente ovalada y un tamaño entre 20 mm y 21 mm. Concibiendo la necesidad de entender el sistema de conductos radiculares por su complejidad, denotando la importancia de la técnica de diafanización dental al reducir las posibilidades de fracaso por la observación de la anatomía de los conductos radiculares tridimensionalmente a través de la transparentación.